中国水仙REMAP反应体系的建立和优化  

Establishment and optimization of REMAP system in Chinese narcissus

作　　者：林晓红[1,2,3] 潘东明[2,3] 

机构地区：[1]漳州城市职业学院,漳州363000 [2]福建农林大学园艺学院,福州350002 [3]福建农林大学园艺产品贮运保鲜研究所,福州350002

出　　处：《安徽农业大学学报》2013年第2期290-293,共4页Journal of Anhui Agricultural University

基　　金：2012年漳州市科技局自然科学基金(ZZ2012J11);2012年福建农林大学创新团队基金共同资助

摘　　要：对影响中国水仙"金盏"品种的REMAP-PCR扩增反应的各个参数进行优化,建立适合中国水仙的REMAP反应体系20μL,包括如下成分:模板DNA 40 ng、dNTPs 0.2 mmol.L-1、引物0.45μmol.L-1、Taq酶1U和10×Buffer(含Mg2+)2μL。扩增程序为反应程序:94℃预变性4 min;94℃变性40 s,55℃退火40 s;72℃延伸90 s,共35个循环;最后72℃延伸10 min,4℃保存。该反应体系标记点位清晰、稳定、重复性好,适宜中国水仙的REMAP分析,为应用REMAP技术鉴定中国水仙种质资源、分子标记辅助选择育种及其遗传多样性研究奠定了基础。Factors affecting REMAP-PCR application of Chinese narcissu Jinzhan were optimized in this study,and REMAP system for Chinese narcissus was established.Each 20 μL amplification reaction consisted of DNA 40 ng,10×Buffer including Mg2＋2 μL,REMAP primer（10 μmol.L-1） 0.45 μmol.L-1,dNTP（10 mmol.L-1） 0.2 mmol.L-1,Ex Taq polymerase（5 U.μL-1）1 U.Amplication was under the following conditions： 4 min at 94℃ for 1cycle,followed by 40 s at 94℃,40 s at 55℃,and 90 s at 72℃ for 35 cycles,then 7 min at 72℃ for a final extension.The clear,stable and reproducible optimal REMAP-PCR reaction system was established for RPMAP analysis of Chinese narcissus,which would lay a good foundation for REMAP analysis on Chinese narcissus resource identification,molecular marker assisted breeding and genetic diversity.

关 键 词：中国水仙 金盏 REMAP 体系建立 优化 

分 类 号：S682.21[农业科学—观赏园艺]