融合表面抗原SA-28基因在Pichia pastoris酵母系统中的表达  

Expression of a Modified HBsAg Gene SA-28 by the Methylotropic Yeast Pichia pastoris

作　　者：袁汉英[1] 邸玉君 高卜渝[2,3] 李育阳[2,3] 

机构地区：[1]复旦大学遗传学研究所,上海200433 [2]复旦大学生命科学学院 [3]复旦大学遗传工程国家重点实验室

出　　处：《复旦学报（自然科学版）》2000年第3期242-246,共5页Journal of Fudan University：Natural Science

基　　金：国家科委八六三高科技资助项目 (86 3 Z18 0 1)

摘　　要：将乙肝病毒表面抗原S preS1融合基因SA 2 8插入质粒载体 pAO815的EcoRⅠ位点中 ,将其置于PichiaPastoris酵母AOX1启动子控制下 .利用电转化技术 ,融合基因表达单元连同HIS4基因被整合到受体菌SMD116 8基因组中 .对得到的工程菌进行发酵和表达产物的研究表明 :SA 2 8基因在该系统中的表达受甲醇诱导调控 ;SA 2 8融合基因的表达产物具有S和PreS1的双重抗原性 .用CsCl密度梯度离心法纯化了表达产物 ,融合抗原活性峰位于密度为 1 19mg/cm3 的区带 .The Hybrid gene SA 28 coding for a modified Hepatitis B surface antigen and preS1 epitope was inserted into EcoRⅠ site of highly stable plasmid pAO815. The SA 28 gene in pAO815 was under the control of the methanol inducible alcohol oxidase(AOX1) promoter. Linearized pPFD1 were transformed into a proteinaseA deficient strain SMD1168 of P. pastoris yeast and integrated in the chromosomal 5' AOX locus forming a homologous recombination. The results showed the expression of SA 28 gene was regulated by methanol and the expression product contains both HBsAg and preS1 antigencity.

关 键 词：SA-28基因 融合表面抗原基因 乙肝疫苗 基因表达 

分 类 号：R392－33[医药卫生—免疫学] R512.620.3[医药卫生—基础医学]