水稻共生菌DX01的分子鉴定及电击转化条件的初步探索  

The Identification of Rice Symbiont DX01 and Establishment of Transformation System by Electroporation

作　　者：曹清玉[1] 刘志学[2,1] 曲志才[2,1] 严建 王海波[2,1] 沈大棱 

机构地区：[1]复旦大学遗传学研究所,上海200433 [2]复旦大学生命科学学院

出　　处：《复旦学报（自然科学版）》2000年第3期282-286,共5页Journal of Fudan University：Natural Science

基　　金：上海市科委基金资助课题

摘　　要：用PCR的方法扩增了水稻表面共生菌DX0 1的 16SrDNA片段 ,并进行了部分序列的测定和BLAST同源序列比较分析 ,结果表明 ,该序列 3′端 5 5 0bp与短小芽孢杆菌 (Bacilluspumilus) 16SrDNA的同源性达 99% ,5′端 6 80bp为 98% ,故DX0 1应为B .pumilus.对其电击法转化的部分条件进行了初步的探索 ,结果表明 :当细菌处于D(6 0 0 )为 0 9的生长期时 ,使用PEB作为电击缓冲液 ,对 2 0 0 μL体积的细胞悬液在电容 2 5 μF ,电阻2 0 0Ω ,电压 1 9kV的电击条件进行完整质粒转化可得到较高的转化率 .s rDNA of rice symbiont DX01 was amplified by PCR and sequenced. Comparison of this sequence with that of other Bacillus 16s rDNA showed that this isolate should be identified as Bacillus pumilus using BLASTN software. A number of factors affecting electroporation transformation efficiency for DX01 were investigated. Several parameters that resulted in high transformation efficiency were: D (600) 0 9, voltage 1.9 kV, buffer PEB, 200 μl cell volume.

关 键 词：水稻共生菌 电击法 病害 防治 DX01 分子鉴定 

分 类 号：S435.111[农业科学—农业昆虫与害虫防治] S476[农业科学—植物保护]