紫杉醇合成关键酶基因dbtnbt的克隆及原核表达  

Cloning and Prokaryotic Expression of dbtnbt Gene Involved in Taxol Biosynthesis

作　　者：苗莉云[1] 张鹏[2,3] 付春华[2] 余龙江[2] 

机构地区：[1]运城学院生命科学系,山西运城044000 [2]华中科技大学生命科学与技术学院资源生物与生物技术研究所,武汉430074 [3]湖北省农业科学院经济作物研究所,武汉430064

出　　处：《湖北农业科学》2012年第9期1912-1915,共4页Hubei Agricultural Sciences

基　　金：国家自然科学基金项目(NSFC 20776058;20906036);中国博士后科学基金项目(20100471183)

摘　　要：从曼地亚红豆杉(Taxus x media)细胞中提取总RNA,通过RT-PCR克隆了dbtnbt基因,测序结果表明dbtnbt基因全长为1 317 bp;将dbtnbt基因与原核表达载体pET32a(+)连接,成功构建了重组质粒pET32a(+)-dbtnbt,并将其转入E.coli BL21 plysS中进行表达,dbtnbt基因的表达产物分子量约为48.4 ku,与预测大小一致。The total RNA of Taxus x media cells were isolated and used to synthesize dbtnbt by RT-PCR.The total lenght of dbtnbt was 1 317 bp.Then the fragments of dbtnbt was ligated into pET32a（＋） to produce the recombinant plasmid pET32a（＋）-dbtnbt,which was transformed into E.coli BL21 plysS for induction expression.The SDS-PAGE results showed that the recombinant plasmid pET32a（＋）-dbtnbt was successfully constructed and expressed;and the molecular weight of the expression product of dbtnbt was about 48.4 ku,which was corresponding to the deduced size.

关 键 词：曼地亚红豆杉(Taxus x media) 紫杉醇 dbtnbt基因 原核表达 

分 类 号：S791.49[农业科学—林木遗传育种]