芥菜SCoT分析体系的建立与优化  

Establishment and Optimization of SCoT System of Mustard

作　　者：龙治坚[1] 王莹[1] 韩国辉[1,2] 陈志[1] 向素琼[1] 梁国鲁[1] 林清[1,3] 

机构地区：[1]西南大学园艺园林学院,重庆400716 [2]重庆市农业科学院果树研究所,重庆江津402260 [3]重庆市农业科学院生物技术研究中心/逆境农业研究重庆市市级重点实验室,重庆401329

出　　处：《西南大学学报（自然科学版）》2013年第4期20-25,共6页Journal of Southwest University(Natural Science Edition)

基　　金：重庆市科技创新能力建设专项(CSTC-2009CA1005)基金资助

摘　　要：采用L25(56)正交设计方法,对影响芥菜SCoT-PCR反应的Mg2+,dNTPs,Taq酶,引物,模板DNA等因素的浓度进行优化,建立了适用于芥菜研究的SCoT-PCR最佳反应体系:20μL反应体系中,含有Mg2+1.875mmol/L,dNTPs 0.35mmol/L,Taq酶2.00U,Primer 0.875μmol/L,模板DNA 10ng.利用芥菜的16个品种对该反应体系进行验证,得到了条带清晰、亮度适中、稳定可靠的电泳图.Orthogonal design （L25 （5^6）） was applied to optimize five influencing factors （Mg2＋, dNTPs, Taq DNA polymerases, primer and template DNA） for the SCoT-PCR reaction system of mustard so as to establish an optimal SCoT system for this plant species. The optimized system was Mg2＋ 1. 875 mmol/L, dNTPs 0.35 mmol/L, Taq DNA polymerases 2.00 U, Primer 0. 875 μmol/L and template DNA 10 ng. Verification of this reaction system with 16 mustard varieties showed that the reaction system was highly stable, and clear bands and reliable electrophoresis graphs were obtained.

关 键 词：芥菜 SCoT 正交设计 体系优化 

分 类 号：S637[农业科学—蔬菜学]