石榴SPAR-PCR反应体系的正交设计优化及验证  

Optimization of SPAR-PCR System in Pomegranate Using Orthogonal Design and Verification

作　　者：王军[1] 杨荣萍[1] 洪明伟[1] 吴兴恩[1] 李甦 姜勤[2] 李文祥[1] 

机构地区：[1]云南农业大学园林园艺学院,云南昆明650201 [2]云南省通海县农业局经济作物工作站,云南通海652700

出　　处：《云南农业大学学报（自然科学版）》2013年第3期376-379,共4页Journal of Yunnan Agricultural University:Natural Science

基　　金：云南省教育厅科学研究基金项目(2011Y445)

摘　　要：以重瓣红花石榴为供试材料,采用五因素四水平的正交设计,对SRAP反应体系中的Taq DNA聚合酶,Mg2+,dNTPs,引物、模板DNA进行优化,最终确定最佳反应体系为:dNTP 0.12 mmol/L,Mg2+2.0 mmol/L,引物0.48μmol/L,Taq酶1.0 u,模板DNA 40 ng,总反应体积为25μL。利用优化后体系随机抽取4份石榴材料进行验证,均能扩增出稳定条带。本研究为SRAP标记技术在石榴分子遗传学中的应用提供了科学依据。The plena safflower pomegranate was used as tested materials and using 5 factors and 4 dimensions orthogonal design to optimize the Taq DNA Polymerase, Mg2＋ , dNTPs, primers, template DNA. Determining the best system was ： dNTP 0. 12 retool/L, Mg2 ＋2.0 retool/L, primer 0.48 p, mol/ L, Taq enzyme 1.0 u, template DNA 40 ng and the total reaction volume was 25 p,L. The optimized system was used to randomly select 4 parts of pomegranate materials as tested materials. They afl can expand stable hands. The research provided scientific basis to the application of SRAP marker techniques in pomegranate molecular genetics.

关 键 词：石榴 SRAP 正交设计 体系优化 

分 类 号：S665.403.2[农业科学—果树学]