白纹伊蚊中肠组织和C6/36细胞与登革病毒相互作用蛋白的筛选  

Screening of proteins interacting with dengue virus from Aedes albopictus midgut tissueand C6/36 cells

作　　者：潘京[1] 朱娉婷[1] 郑学礼[1] 

机构地区：[1]南方医科大学病原生物学教研室,广州510515

出　　处：《中国人兽共患病学报》2013年第5期447-451,共5页Chinese Journal of Zoonoses

基　　金：国家自然科学基金(No.30972566;81271880)资助~~

摘　　要：目的筛选登革Ⅱ型病毒与白纹伊蚊中肠组织和C6/36细胞中的连接分子。方法富集纯化登革Ⅱ型病毒,用12%SDS-PAGE分析提取的C6/36细胞膜蛋白和白纹伊蚊中肠组织总蛋白,将分离胶上的蛋白转于硝酸纤维素膜(PVDF)上,应用病毒覆盖蛋白结合试验(VOPBA)方法筛选白纹伊蚊中肠组织和C6/36细胞中表达连接登革Ⅱ型病毒的分子。结果白纹伊蚊中肠组织总蛋白经12%SDS-PAGE分离后转膜,分别与纯化的病毒液和阴性对照液孵育,用抗登革病毒单克隆抗体检测,结果显示病毒孵育组在分子量30kDa的位置有特异性的条带出现,而阴性对照组无此条带;用同样的方法筛选C6/36细胞上表达蛋白,病毒孵育组在分子量30kDa和40kDa的位置出现特异条带,而阴性对照组无。结论 VOPBA结果显示分子量为30kDa的分子在中肠组织与C6/36细胞中都能表达,具有连接登革Ⅱ型病毒的作用,对其氨基酸序列的鉴定和功能分析工作正在进行中。To screen the molecules binding dengue Ⅱ virus expressed in Aedes albopictus midgut tissue and C6/36 cells, C6/36 cells were infected with dengue Ⅱ virus, and the virus were collected and purified. The total proteins of Aedes albopictus midgut tissue and membrane proteins of C6/36 cells were extracted and analyzed using12% SDS-polyacrylamide gel （PAGE）. After electrophoresis, the proteins were transferred to a nitrocellulose membrane, and virus overlay protein binding assay （VOPBA） was carried out using an anti-dengue virus monoclonal antibody;

关 键 词：登革病毒 白纹伊蚊中肠 C6 36细胞 受体分子 

分 类 号：R373[医药卫生—病原生物学]