猪核转录因子C/EBPβ真核表达载体的构建及表达  

作　　者：陶晓莉[1] 吕利英[1] 朱弘焱[1] 苏玉虹[1] 

机构地区：[1]辽宁医学院畜牧兽医学院,辽宁锦州121000

出　　处：《畜牧与兽医》2013年第6期36-39,共4页Animal Husbandry & Veterinary Medicine

基　　金：辽宁省科技厅重点实验室项目(200948-6)

摘　　要：通过构建猪核转录因子C/EBPβ编码区真核表达体pEGFP-N1-C/EBPβ,将猪C/EBPβ异位表达于小鼠成肌细胞C2C12细胞中,为进一步研究C/EBPβ在猪脂肪发育中的调控机制奠定基础。本试验利用RT-PCR扩增C/EBPβ编码区序列并测序,提交GenBank;并将其克隆至真核表达载体pEGFP-N1,通过双酶切和测序鉴定重组质粒。将重组表达体pEGFP-N1-C/EBPβ导入C2C12细胞,荧光显微镜下观察C/EBPβ在细胞中的定位,半定量RT-PCR和Western blot检测C/EBPβ在细胞中的表达情况。本试验成功克隆测序了猪C/EBPβ基因编码区序列,并首次上传到GenBank;成功构建猪C/EBPβ真核表达体pEGFP-N1-C/EBPβ,并将其异位表达。结果表明:猪C/EBPβ在脂肪组织中表达量丰富,心肌和背最长肌表达微量,并且正确插入真核表达载体pEGFP-N1,荧光显微镜下观察重组体组主要集中在细胞核;而C/EBPβ基因和蛋白在转染重组体C2C12细胞中均有表达。本研究为提高猪肉肌内脂肪含量方面的研究提供新的思路。

关 键 词：猪 C EBPβ pEGFP-N1-C EBPβ C2C12 表达 

分 类 号：S828[农业科学—畜牧学]