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作 者:严进[1] 倪灿荣[2] 何成[1] 王成海[1] 路长林[1] 鲍璿[3] 唐铁山 黄秀英 孙方臻
机构地区:[1]第二军医大学神经生物学教研室,上海200433 [2]第二军医大学病理解剖学教研室,上海200433 [3]中国科学院上海脑研究所 [4]中国科学院北京发育生物学研究所
出 处:《解剖学杂志》2000年第4期295-300,共6页Chinese Journal of Anatomy
基 金:国家自然科学基金 !(批准号 :396 70 2 5 9;39930 0 80 );军队医药卫生科研基金! (批准号 :96 M0 77;98M0 79)
摘 要:目的 :通过探讨睫状神经营养因子对谷氨酸引起海马神经细胞内游离 Ca2 + 浓度和 P53蛋白表达的作用 ,提供睫状神经营养因子存在非基因组快速作用途径 ,并对基因组信号转导产生影响的证据。方法 :用活细胞内荧光探针 Fura2 / AM实时检测睫状神经营养因子对谷氨酸引起海马神经细胞内游离 Ca2 + 浓度的影响 ,并用免疫组化方法观察睫状神经营养因子对谷氨酸引起海马神经细胞内 P53蛋白表达的作用。结果 :谷氨酸可引起海马神经细胞内游离 Ca2 + 浓度快速升高 ,并在 50 0μmol/ L-1范围内呈剂量依赖性。2 0 0μmol/ L-1的谷氨酸可上调 P53蛋白表达。睫状神经营养因子对静息条件下海马神经细胞内的游离 Ca2 + 浓度无显著改变。用睫状神经营养因子孵育 5min后 ,可快速压抑谷氨酸引起的胞内游离 Ca2 + 浓度升高 ,并下调 P53蛋白表达。结论 :睫状神经营养因子可能通过Ca2 +信号的快捷途径 。To investigate the effect of ciliary neurotrophic factor(CNTF) on concentrations of hippocampal intracellular free Ca 2+ ([Ca 2+ ] i) and expression of protein P53 induced by glutamic acid. Methods: [Ca 2+ ] i and expression of protein P53 in the primary cultured hippocampal neurons were measured with the calcium sensitive fluorescent dye fura2/AM and immunohistochemical detection. Results: Glutamic acid rapidly induced increase of [Ca 2+ ] i. 200 μmol·L -1 glutamic acid upregulated expressin of prtoein P53. CNTF had no influence on [Ca 2+ ] i in resting condition. CNTF incubated for 5 min could repress increase of [Ca 2+ ] i induced rapidly by glutamic acid. And CNTF depressed expression of protein P53 for 10 h. Conclusion: It is probable that a rapid pathway of CNIF via Ca 2+ signal exists in the upstream of genomic signal transductive pathway.
关 键 词:海马神经细胞 睫状神经营养因子 谷氨酸 P53 钙
分 类 号:R338[医药卫生—人体生理学]
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