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作 者:秦宇[1] 邓芙蓉[1] 魏红英[1] 韩丽敏[2,3] 许珺辉[1] 郭新彪[1]
机构地区:[1]北京大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学系,北京100191 [2]北京大学衰老研究中心,北京100191 [3]北京大学基础医学院生物化学与分子生物学系,北京100191
出 处:《北京大学学报(医学版)》2013年第3期412-416,共5页Journal of Peking University:Health Sciences
基 金:国家自然科学基金(21077006);国家高技术研究发展计划(863计划)(2012AA062804)资助~~
摘 要:目的:探讨纳米银中可溶性银离子对皮肤细胞HaCaT间隙连接通讯的影响。方法:将1 g/L纳米银储备液于4℃,20 000×g离心2 h后,吸取上清作为银离子储备液,采用电感耦合等离子体质谱法测定其中银离子含量。采用细胞划痕染料标记示踪技术检测细胞间隙连接通讯的改变;分别采用蛋白免疫印迹和实时荧光定量PCR技术检测连接蛋白43(connexin 43,Cx43)及其mRNA表达的变化。结果:不同浓度银离子(0.01、0.1和1.0 mg/L)对HaCaT细胞间隙连接通讯无明显影响。进一步的研究发现,经上述不同浓度银离子作用后,细胞Cx43蛋白及mRNA水平均无明显改变。结论:纳米银材料中可溶性银离子对HaCaT细胞间隙连接通讯的影响及其作用特征可能与纳米银不同。Objective:To further investigate the effects of silver ion (Ag + ) dissolved from silver nano- particles (AgNps) on gap junctional intercellular communication (GJIC) between HaCaT cells. Methods: In this study, 20 000 × g of 1 g/L AgNps suspension were centrifuged at 4 ℃ for 2 h, then the supernatant was collected as Ag+ stock solution and measured by inductively coupled plasma massspectrometry (ICP-MS) ; GJIC was detected by the scrape loading/dye transfer assay; connexin 43 (C×43) protein and mRNA level were estimated by Western-blot and RT-PCR, respectively. Results: Different concentrations ofAg+ (0.01, 0. 1 and 1.0 rag/L) did not affect the GJIC significantly. No no- table changes were observed in expression of Cx43 protein and mRNA. Conclusion: The characteristics of Ag+ and the effects on gap junctional intercellular communication between HaCaT cells may be different from those of AgNps.
关 键 词:金属纳米粒子 银 细胞间通讯 连接蛋白43 缝隙接合部
分 类 号:R318.08[医药卫生—生物医学工程]
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