Rv3872/CFP-10/ESAT-6融合蛋白的人工合成及表达  

作　　者：王楠[1] 付延军 赵子丰[3] 王春华 王晓锋[1] 

机构地区：[1]吉林省动物疫病预防控制中心,吉林长春130062 [2]吉林市农科院,吉林吉林市132000 [3]吉林正业生物制品股份有限公司,吉林吉林市132000

出　　处：《吉林畜牧兽医》2013年第6期33-35,共3页Jilin Animal Husbandry and Veterinary Medicine

摘　　要：根据牛分枝杆菌AF2122/97基因组中Rv3872、CFP-1O和ESAT-6全长基因序列,以柔性linke(rG4S)3,将三基因序列进行串联,形成表达基因盒(Rv3872-CFP1O-ESAT6,RCE),人工合成并克隆于PUC57转移载体上(PUC57-RCE)。经EcoRI和HindIII双酶切PUC57-RCE,回收纯化RCE片段,与经过相同双酶切的pET-28a载体,于16℃水浴连接过夜,连接产物转化大肠杆菌DH5a感受态细胞,重组质粒经培养鉴定,测序结果证实插入的REC片段序列编码和方向与预期一致。在优化的诱导条件下表达蛋白,分段收集样本,并各取少量进行SDS-PAGE,经Western-blot分析显示,融合蛋白RCE具有较好的免疫原性,与阳性牛血清在35kDa位置处有明显的反应带。

关 键 词：奶牛结核病 融合蛋白 Rv3872 CFP-10 ESAT-6 人工合成 表达 

分 类 号：S852.618[农业科学—基础兽医学]