一株H1N1亚型猪流感病毒的分离鉴定及生物学特性分析  

Isolation, identification and biological characteristics of an H1N1 subtype isolate of swine influenza virus

作　　者：白昀[1,2] 冯志新[1] 甘源[1] 刘占军[1] 张旭[1] 韦艳娜[1] 马庆红[1] 邵国青[1] 

机构地区：[1]江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京210014 [2]南京天邦生物科技有限公司,江苏南京211102

出　　处：《中国预防兽医学报》2013年第7期521-525,共5页Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine

基　　金：江苏省农业自主创新项目(CX(11)2048)

摘　　要：为调查南京地区猪流感流行情况,本研究于2011年2月～5月期间从南京某屠宰场采集健康猪的鼻拭子和肺脏组织样品共690份,常规无菌处理后进行RT-PCR检测,将检测为阳性的样品接种9日龄～11日龄SPF鸡胚分离猪流感病毒(SIV)。对分离株进行血凝试验、EID50测定、HA及NA基因测序分析和感染小鼠及猪体试验。结果有18份样品RT-PCR显示为SIV阳性,但只有一株可在SPF鸡胚中稳定增殖。该病毒分离株具有凝集0.5%鸡红细胞的活性,EID50为10-6.32/0.1 mL,基因测序显示其HA、NA基因片段均与09年H1N1型流感流行株A/California/04/2009(H1N1)高度同源,将其命名为A/Swine/Nanjing/50/2011(H1N1)。小鼠人工感染试验表明该分离株可引起小鼠死亡(3/10),猪体人工感染实验显示该分离株还能够引发猪体明显的流感症状及肺部病变。该病毒的分离鉴定及HA、NA基因序列分析为进一步调查SIV的流行规律提供了基础数据。To investigate the swine influenza epidemic, we collected nasal swabs and lung tissues from 690 health slaughtered pigs in Nanjing area and 18 samples were positive for swine influenza virus （SIV） detected by RT-PCR. One virus was isolated by inoculation of 10-day-old embryonated eggs via allantoic cavities and identified as H1N1 subtype, designated A/Swine/Nanjing/ 50/2011 （H 1N I）. The HA and NA sequence analysis shown that the isolate were closely identical to A/California/04/2009 （H1N1）. In addition, the pathogenic tests demonstrated the virus was able to cause death in mice （3/10） and induce clinical signs and lung lesions in pigs. This study provided useful information and basic data for the further investigation of epidemic principles and patterns of SIV in China.

关 键 词：猪流感病毒 H1N1亚型 分离鉴定 HA基因 NA基因 

分 类 号：S852.65[农业科学—基础兽医学]