不同HIF-1α基因诱导人骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的效能差异  

作　　者：刘城[1] 王月刚[1] 吴平生[1] 裴静娴[1] 赖艳娴[1] 

机构地区：[1]广州市第一人民医院心血管内科,510180

出　　处：《广州医药》2013年第4期7-10,共4页Guangzhou Medical Journal

基　　金：国家自然科学基金(81100235);广州市科技计划重点项目(2012J4100035);广州市医药卫生科技项目资助(20121A011006)

摘　　要：目的研究腺病毒介导的野生型及突变型低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)基因诱导人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)向心肌细胞(cardiomyocyte)分化过程中的效能差异。方法重组腺病毒Ad-LacZ、Ad-HIF-1αnative、Ad-HIF-1α564、Ad-HIF-1α564/402及Ad-HIF-1α564/803分别以最佳转染复数转染体外5-氮胞苷(5-azacytidine,5-aza)诱导的hMSCs,于诱导培养后第6周提取细胞浆蛋白,应用酶联免疫分析检测法或Western blot检测法分别测定其中的心肌肌钙蛋白I(cTnI)、HIF-1α、VEGF及Nkx2.5蛋白表达水平。结果经5-aza诱导hMSCs第6周cTnI值为:对照组(0.700±0.013)、Ad-LacZ组(0.702±0.006)、Ad-HIF-1αnative组(0.729±0.004)、Ad-HIF-1α564组(0.741±0.008)、Ad-HIF-1α564/402组(0.764±0.009)及Ad-HIF-1α564/803组(0.804±0.021),各实验组cTnI表达差异有统计学意义(P<0.05),其中尤以Ad-HIF-1α564/803组cTnI表达水平最高,与前述其它各组相比差异有统计学意义(P值均<0.05)。Western blot结果显示:与Ad-LacZ组相比,Ad-HIF-1αnative组、Ad-HIF-1α564组、Ad-HIF-1α564/402组、Ad-HIF-1α564/803组HIF-1α、VEGF及Nkx2.5蛋白均升高(P<0.05),其中以Ad-HIF-1α564/402组HIF-1α蛋白表达水平最高(P值均<0.05),以Ad-HIF-1α564/803组VEGF及Nkx2.5蛋白表达水平最高(P<0.05)。结论野生型及不同突变型HIF-1α基因均可促进hMSCs向心肌细胞分化,尤以Pro564 Asn803双突变型HIF-1α基因(HIF-1α564/803)作用最强。

关 键 词：低氧诱导因子1Α 骨髓间充质干细胞 心肌细胞 分化 差异性 

分 类 号：R329[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]