改良大鼠膀胱平滑肌细胞急性酶分离法及膜片钳应用  

作　　者：钟晓[1,2] 王青青[3] 何鹏[1] 邓建平[3] 李龙坤[3] 黄赤兵[2] 宋波[1] 

机构地区：[1]第三军医大学西南医院全军泌尿外科研究所,重庆400038 [2]第三军医大学新桥医院泌尿外2科,重庆3400037 [3]第三军医大学新桥医院泌尿外1科,重庆400037

出　　处：《第三军医大学学报》2013年第15期1641-1643,共3页Journal of Third Military Medical University

基　　金：国家自然科学基金(81170704)

摘　　要：目的改良大鼠膀胱平滑肌细胞急性酶分离方法,为利用膜片钳技术研究膀胱疾病提供必要的技术平台。方法采用木瓜蛋白酶和胶原酶Ⅱ,采用一步法和二步法,分别消化5只新生和成年Wistar大鼠膀胱组织,在膜片钳工作台上分别对平滑肌细胞钠钙交换体电流行全细胞记录。结果建立了稳定的新生和成年大鼠膀胱平滑肌细胞急性酶分离方法。新生大鼠钠钙交换体(Na+/Ca2+exchanger,NCX)电流密度(pA/pF)为[(0.21±0.07),n=4],成年大鼠NCX电流密度为[(0.19±0.06),n=6],差异有统计学意义(P<0.05)。KB-R7943在5μm浓度下,有阻滞NCX正向模式的能力。结论本方法改良了大鼠膀胱平滑肌细胞急性酶分离,并成功应用于膜片钳技术检测。

关 键 词：大鼠 膀胱 平滑肌 膜片钳 

分 类 号：R694[医药卫生—泌尿科学] R337.5[医药卫生—外科学]