HSV-1 UL18基因重组载体的构建及其编码蛋白VP23的表达  

Construction of recombinant vector of UL18 gene of HSV-1 and expression of its encoding protein VP23

作　　者：杨攀[1] 金富军[1] 夏敏 侯志波[1] 王一飞[1] 任哲[1] 

机构地区：[1]暨南大学生物医药研究开发基地广东省生物工程药物重点实验室基因工程药物国家工程研究中心,广州510632 [2]广东同德药业有限公司,湛江524000

出　　处：《中国卫生检验杂志》2013年第7期1639-1640,1664,共3页Chinese Journal of Health Laboratory Technology

基　　金：国家自然科学基金面上项目(81274170);十二五国家科技支撑计划;基于南药小分子化合物的抗单纯疱疹病毒药靶发现及药物开发(SQ2011SF12B02099);省部产学研结合创新科技平台(2010b091000013);单纯疱疹病毒基因敲除活疫苗研制;国家十二五"863"重大课题"黏膜感染疾病疫苗技术及产品研究"(2012AA02A405)子课题(2012AA02A405-6)

摘　　要：目的:构建含有单纯疱疹病毒1型(HSV-1)UL18基因的原核表达载体。方法:先将UL18基因进行全序列PCR扩增,再将PCR产物克隆进pET-28a(+)质粒,最后将重组质粒转化进入原核表达系统E.coli BL21(DE3)中表达出带有6个组氨酸标签的重组VP23蛋白。结果:UL18基因正确重组进pET-28a(+)质粒,并在E.coli BL21(DE3)中表达。结论:成功构建单纯疱疹病毒1型(HSV-1)UL18基因的重组载体,并在原核表达系统表达出其编码的衣壳蛋白VP23且带有组氨酸标签,为进一步优化VP23在发酵中的最佳表达条件,纯化并大量制备VP23,以及制备VP23的多克隆抗体奠定了基础。Objective： To construct the prokaryotic expression vectors containing UL18 gene. Methods： UL18 gene was amplified by PCR and cloned into plasmid pET - 28a（ ＋ ）. Then the recombinant plasmids were trans- formed into prokaryotic expressing system E. coli BL21 （ DE3 ） to express recombinant VP23 attaching with a 5 - His tag. Results： UL18 gene was correctly recombined into plasmid pET -28a（ ＋ ） , and expresses its encoding protein VP23 in E. coli BL21 （DE3）. Conclusion： The recombinant vectors containing UL18 gene were successfully constructed, and its encoding capsid protein VP23 attaching with a 6 - His tag was also expressed in prokaryotic expressing system, lying a foundation for further optimization of fermentation conditions, purification and preparation of VP23 polyclonal antibody.

关 键 词：单纯疱疹病毒1型(HSV-1) VP23 三聚体 原核表达 

分 类 号：R373.9[医药卫生—病原生物学]