构建逆转录病毒PBabepuro-Bcl-2表达质粒及稳定转染细胞株  

作　　者：杜星[1] 付旭锋[1] 张志毕[1] 陈贵元[1] 崔清华[1] 

机构地区：[1]云南大学生命科学学院,云南昆明650091

出　　处：《科技信息》2013年第23期2-3,共2页Science & Technology Information

基　　金：教育部第41批"留学回国人员科研启动基金"项目项目编号2011508;云南大学学术带头人科研启动基金项目项目编号XT412002;2012年第五届云南大学研究生科研课题项目研究成果;项目编号ynuy07

摘　　要：目的:构建pBabepuro-Bcl-2逆转录病毒表达质粒,鉴定表达,在小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3中建立过表达Bcl-2稳定转染细胞。方法:以人上皮细胞的cDNA为模板,利用X-tremeGENE HP(Roche)转染293T细胞,蛋白质免疫印迹法在蛋白水平检测表达,利用逆转录病毒感染NIH3T3细胞。结果:成功构建了逆转录病毒表达质粒pBabepuro-BCl-2,蛋白水平检测证实其在293T细胞可以有效地表达,成功建立了过表达Bcl-2的NIH3T3稳定转染细胞。结论:通过构建pBabepuro表达质粒及在NIH3T3建立过表达Bcl-2稳定转染细胞,为进一步研究Bcl-2的功能调控奠定了基础。

关 键 词：克隆构建 BCL-2 逆转录病毒 NIH3T3细胞 

分 类 号：Q782[生物学—分子生物学]