MTX对映体耐药A549细胞株中EGFR基因mRNA的表达分析  

The mRNA expression and promoter methylation analysis of epidermal growth factor receptor in methotrexate enantiomer-resistant A549 cell lines

作　　者：张勇银 沈佐君 何晓东 孙余婕 张永娟 

机构地区：[1]安徽医科大学附属省立医院,安徽省临床检验中心,合肥市230001

出　　处：《实用检验医师杂志》2013年第1期10-13,共4页Chinese Journal of Clinical Pathologist

基　　金：国家自然科学基金资助项目（30672011）;安徽省自然科学基金资助项目（050430902）;安徽省人才开发资金资助项目（20052040）

摘　　要：【摘要】目的探讨表皮生长因子受体（epidermalgrowthfactorreceptor，EGFR）在氨甲喋呤（methotrexate，MTX）对映体L-（＋）-MTX和D-（-）-MTX耐药A549细胞株中的表达。方法采用RT-PCR方法测定肺癌A549敏感细胞株和15p,moUL、35p,mol／L、55p,mol／L的L-（＋）-MTX和D-（-）-MTXA549耐药细胞株中EGFRmRNA表达情况。结果15μmol／L、35μmol／L、55μmol／LL-（＋）-MTXA549耐药细胞株中EGFR基因表达的mRNA相对含量分别为肺癌A549敏感细胞株的（1．55±0．26）倍、（1．86±0．13）倍、（1．20~0．05）倍。RT—PCR结果显示，A549敏感细胞株和L-（＋）-MTX各浓度A549耐药株均扩增出315bp条带，有EGFR基因表达，而3种浓度的D-（-）-MTX耐药细胞株中EGFR基因不表达。结论MTX诱导耐药后A549细胞株中EGFRmRNA发生变化，且在3种浓度两种对映体细胞株间具有明显的手性差异，MTX可能通过改变EGFR基因启动子的甲基化状态，影响EGFR的表达。Objective To study the expression of epidermal growth factor receptor （EGFR） in methotrexate （MTX） enantiomer-resistant A549 cell lines [L-（＋）-MTX and D-（-）-MTX]. Methods The ex- pression of EGFR on genetic level was determined by RT-PCR in lung cancer A549 sensitive cells, and MTX enantiomer-resistant A549 cells [L-（＋）-MTX and D-（-）-MTX], with the concentration of drug resistance was 15 μmol/L, 35 txmol/L, 55 μmol/L. Results The genetic expression levels of EGFR were （1.55 ±0.26）, （1.86±0.13） and （1.20±0.05） folds in L-（＋）-MTX/A549 cells compared with lung cancer A549 sensitive cells. RT-PCR results showed that there were 315 bp bands in A549 sensitive cell and L-（＋）-MTX/A549 cells, but in D-（-）-MTX/A549 cells barely expressed. Conclusion The expression level of EGFR on genetic level in drug resistant cells have been changed, and significant difference in two enantiomer-resistant cells are ap- peared. The expression of EGFR is affected by MTX which alte the methylation status of EGFR.

关 键 词：表皮生长因子受体 氨甲喋呤 对映体 反转录聚合酶链反应 

分 类 号：R285.5[医药卫生—中药学]