猪链球菌噬菌体SMP末端酶大亚基单位的活性研究  

Bioactivity of Terminase Large Subunit Encoded by Streptococcus suis Phage

作　　者：毛紫微[1] 吉文汇[1] 杜斌[1] 邹绮[1] 严亚贤[1] 孙建和[1] 

机构地区：[1]上海交通大学农业与生物学院上海市兽医生物技术重点实验室,上海200240

出　　处：《上海交通大学学报（农业科学版）》2013年第4期70-75,共6页Journal of Shanghai Jiaotong University(Agricultural Science)

基　　金：国家自然科学基金项目(31172381);国家公益性行业(农业)科研专项(201303041);上海市基础研究重点项目(12JC1404700)

摘　　要：末端酶(terminase)是dsDNA病毒包装过程中的必要功能蛋白,其大亚基单位在包装过程中往往行使全酶的作用,一般具有ATP酶活性和限制性内切酶活性。噬菌体SMP是猪链球菌2型的烈性噬菌体,本研究以SMP基因组为模板,扩增SMP末端酶大亚基单位基因(TlsSMP),构建pEASY-E1-Tls重组质粒,在大肠杆菌中诱导表达,并对TlsSMP融合蛋白进行活性检测。结果显示,末端酶大亚基单位在大肠杆菌中呈可溶性表达,具有ATP酶生物学活性,在pH7、23℃和Mg2+存在的条件下,其活性最强,其他金属离子如Ca2+、Mn2+和Co2+都对其有不同程度的抑制作用。本研究为进一步研究猪链球菌噬菌体的包装机制奠定基础。Terminase is the essential protein that mediates dsDNA packaging into the viral procapsid. Generally, the large subunit of terminase has ATPase and restriction enzyme activity. The Tls gene （TlsSMP） derived from a virulent Streptococcus suis phage （SMP） was amplified by PCR and then subcloned into an expressing vector of pEASY-E1. The recombinant plasmid pEASY-E1-Tls was transformed into E. coli BL21 （DE3）. The results showed that the recombinant TlsSMP protein was expressed in supernatant after induction with IPTG. The maximum bioactivity could be reached at pH7, 23℃ and with Mg2＋ existed. The study of TlsSMP will provide information for future uncovering of Streptococcus suis phage packaging mechanisms.

关 键 词：猪链球菌 噬菌体 末端酶 大亚基单位 

分 类 号：Q79[生物学—分子生物学]