一种改造载体多克隆位点的新方法  

A Novel Method of the Reconstruction of Vector Multiple Cloning Sites

作　　者：李磊[1] 薛芗[1] 左示敏[1] 陈宗祥[1] 张亚芳[1] 李前前[1] 潘存红[2] 朱俊凯[2] 马玉银[3] 潘学彪[1] 

机构地区：[1]扬州大学农学院 江苏省作物遗传生理国家重点实验室培育点/教育部植物功能基因组学重点实验室,江苏扬州225000 [2]江苏里下河地区农业科学研究所,江苏扬州225000 [3]扬州职业大学生化工程系,江苏扬州225000

出　　处：《生物技术》2013年第4期40-43,共4页Biotechnology

基　　金：国家自然科学基金项目(31201180);江苏省自然科学基金项目(BK2008223;BK2012690);江苏高校优势学科建设工程项目资助

摘　　要：目的:探寻一种快速的、便捷的改造已知载体多克隆位点的方法。方法:应用一对5’末端分别添加了多个酶切位点的引物扩增任一已知DNA片段,用两端的限制性酶酶切后连接至载体多克隆位点中,从而引入两个新的酶切位点。我们将这一方法称为衔接子引物-PCR引入法。结果:两个研究实例的酶切结果证实:结果预先设计的酶切位点已替换至载体的多克隆位点,且引入的酶切位点能被顺利切割。结论:衔接子引物-PCR引入法是一种改造已知载体多克隆位点的可行方法。Objective：Finding a way to reconstruct the vector MCS rapidly and easily. Method：The DNA fragment was amplified with prim- er pairs, whose 5＇ ends with several restriction sites. Then the DNA fragment was inserted into MCS of vector after digestion with endonu- clease in its both sides. This method was named adaptor primer -PCR introducing. Result：Digestion with endonuclease prove that the de- signed restriction sites have been inserted into MCS of the vector and the restriction sites were digestible, by using two examples. Conclusion：The adaptor primer - PCR introducing method was a feasible technique to reconstruct the vector MCS.

关 键 词：多克隆位点 改造 衔接子引物 

分 类 号：Q782[生物学—分子生物学]