Zacopride通过PKA途径选择性激动大鼠心肌Kir2．1通道  

作　　者：张莉[1,2] 刘清华[3] 刘成芳[2] 翟旭雯[2] 封启龙[2] 许瑞龄[3] 崔香丽[2] 赵志青[2,4] 曹济民[5] 吴博威[2] 

机构地区：[1]山西省儿童医院,太原030013 [2]山西医科大学生理学系,太原030001 [3]山西医科大学病理生理学系,太原030001 [4]Department of Biomedical Sciences,Mercer University School of Medicine,Savannah 31404,Georgia,USA [5]中国科学院基础医学研究所&北京协和医学院基础医学院,北京100005

出　　处：《中国科学：生命科学》2013年第9期753-761,共9页Scientia Sinica(Vitae)

基　　金：国家自然科学基金(批准号:81170145,31200864和31171088);山西省卫生厅科技攻关项目(批准号:2011055)资助

摘　　要：前期研究发现促胃肠动力药zacopride(5-HT4受体激动剂兼5-HT3受体拮抗剂)通过选择性激动大鼠心室肌内向整流钾电流(inward rectifier potassium current,IK1)表现出抗室性心律失常无房性致心律失常作用,本研究旨在探讨zacopride这一独特的药理特性的分子机制.采用胶原酶法急性分离大鼠心房肌细胞;利用全细胞膜片钳技术观察zacopride对大鼠心房肌细胞IK1电流、细胞跨膜电位和在HEK293细胞上表达的大鼠心肌Kir2.1,Kir2.2,Kir2.3通道和磷酸化位点突变的Kir2.1(S425L)通道的效应,以及干预5-HT受体和干预PKA,PKC,PKG信号通路的工具药对zacopride调节IK1作用的影响.运用Western blot分析大鼠心房肌及心室肌kir2.x通道构成.结果表明,zacopride对大鼠心房肌细胞IK1电流及跨膜电位无显著影响;可使HEK293细胞上表达的同源Kir2.1外向电流增加40.7%±9.7%(在50 mV,P<0.01),而对同源Kir2.2、同源Kir2.3及异源Kir2.1+Kir2.2,Kir2.1+Kir2.3和Kir2.2+Kir2.3通道电流均无明显作用.Western blot分析显示,Kir2.3表达量在大鼠心房及心室无明显差异,而大鼠心房Kir2.1的表达量仅为心室相应量的25%;HEK293细胞上5-HT3受体缺失,5-HT4受体呈低表达水平.PKA抑制剂能够显著抑制zacopride激动Kir2.1电流的效应,而PKC,PKG抑制剂不能影响这一效应;zacopride在50 mV可使Kir2.1 S425L突变体电流增加13.3%±6.5%,但无统计学意义(P>0.05).以上结果提示,zacopride激动Kir2.1电流的效应是经AC/cAMP/PKA信号通路介导的,而与其对5-HT3和5-HT4受体的作用无关.

关 键 词：zacopride 内向整流钾通道 5-HT受体 蛋白激酶 

分 类 号：R965[医药卫生—药理学]