血管紧张素转换酶2基因转染抑制大鼠颈总动脉缺血再灌注损伤后内膜新生  

Angiotensin-converting enzyme 2 gene transfer attenuates neointimal formation after carotid artery ischemia-reperfusion injury in rats

作　　者：吴旭玮[1] 卢卓强[1] 龚晶婧[1] 王华军[1] 许昌声[1] 晋学庆[1] 

机构地区：[1]福建医科大学附属第一医院心内科福建省高血压研究所,福州350005

出　　处：《中华心血管病杂志》2013年第9期771-777,共7页Chinese Journal of Cardiology

基　　金：福建省教育厅科技项目（JXK200703）

摘　　要：目的 探讨慢病毒重组血管紧张素转换酶（LV-ACE）2基因过表达对于大鼠颈总动脉缺血再灌注损伤（IRI）后内膜新生的影响和相关机制。 方法 将SD大鼠分为正常对照组、假手术组、IRI后1、2、4周亚组，每组10只，采用夹闭颈总动脉方法制造动脉硬化模型，HE染色观察各组新生内膜面积/中膜面积（I/M）值；另选SD大鼠50只，分为5组：对照组、IRI组、IRI＋慢病毒重组绿色荧光蛋白（LV-GFP）组（GFP组）、IRI＋LV-ACE2组（ACE2组）和IRI＋紫杉醇组（紫杉醇组），每组10只，夹闭法后利用LV-ACE2干预，并用LV-GFP、紫杉醇等作为对照。HE染色观察各组I/M值，免疫组织化学方法观察各组新生内膜中ACE2、平滑肌细胞α-肌动蛋白（α-SM-actin）、血小板内皮细胞黏附分子（CD31）、血管紧张素1型受体（AT1R）、细胞外信号调节激酶磷酸化（P-ERK1/2）表达变化。 结果 （1）IRI后，HE染色观察损伤组的1、2、4周亚组I/M值（分别为0.364±0.032、0.789±0.120和1.517±0.151）均高于正常组（0.011±0.004，P均〈0.01）。（2）LV-ACE2等干预后，HE染色观察ACE2组I/M值低于IRI组（0.71±0.17比1.53±0.16，P〈0.01）；免疫组织化学观察ACE2组ACE2表达积分吸光度（IA）值与IRI组比较，差异无统计学意义（1294±283比1080±252，P=0.63），ACE2组CD31表达血管密度低于IRI组［（12.40±4.21）个/mm2比（96.20±17.79）个/mm2，P〈0.01］，ACE2组α-SM-actin、AT1R、P-ERK1/2表达IA值均低于IRI组（分别为5 843±839比12 648±1 760，1 219±175比4 861±545，1 040±215 比2 938±286, P均〈0.01） 结论 大鼠颈总动脉IRI后4周能够形成稳定的内膜新生，ACE2能明显抑制IRI后内膜新生、新生内膜中平滑肌细胞增殖及新生血管生成，其机制可能与ACE2抑制AT1R、P-ERK1/2的表达有关。Objective To explore the effects of lentiviral recombinant angiotensin-converting enzyme 2 （LV-ACE2） gene transfer on the neointimal formation after carotid artery ischemia-repeffusion injury （IRI） and related mechanisms. Methods IRI was induced in SD rats through the carotid artery clipping and rats were divided into IRI, IRI ＋ LV-GFP, IRI ＋ LV-ACE2, IRI ＋ paclitaxel groups （ n = 10 each）. Sham operated rats serve as normal control. Four weeks later, neointimal formation was observed on HE stained carotid artery sections. The protein expression of ACE2, α-SM-actin, CD31, AT1R and P-ERK were detected by immunohistochemistry. Results （1） Carotid artery neointimal hyperplasia was readily shown in IRI group [ I/M ： 1.517 ± 0. 151 （4 weeks later） vs. 0. 011 ± 0. 004 （Sham） , P 〈 0. 01 ] , which was significantly reduced in IRI ＋ LV-ACE2 （ 0. 71 ± 0. 17 ） and IRI ＋ paclitaxel （0. 89 ± 0. 21 ） groups. （2） The growth of vascular smooth muscle cells and neovascularization were also significantly inhibited in IRI ＋ LV-ACE2 group and the expression of α-SM-actin （5 843 ± 839 vs. 12 648 ± 1 760, P 〈 0. 01 ） and CD31 [（12.40±4.01）/mm^2 vs. （96.20±17.79）/mm^2,P〈0. 01], AT1R （1 219±175 vs. 4 861± 545, P 〈 0. 01 ） and P-ERK1/2 phosphorylation （ 1 040 ± 215 vs. 2 938 ± 286, P 〈 0. 01 ） in the neointiinal of the injury arteries in IRI ＋ LV-ACE2 group were significantly downregulated compared to IRI group. Conclusion This data suggest that ACE2 gene overexpression is able to attenuate neointimal formation after ischemia-reperfusion injury possibly through downregulating AT1 receptor expression and signal pathway of ERK1/2 phosphorylation.

关 键 词：肽基二肽酶A 血管内膜 新生血管化 病理性 再灌注损伤 

分 类 号：R543.4[医药卫生—心血管疾病]