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作 者:陈娟[1,2] 周洁[2] 严成其[2] 王栩鸣[2] 杨勇[2] 余初浪[2] 程晔[2] 陈剑平[2]
机构地区:[1]浙江师范大学生化学院,浙江金华321000 [2]浙江省农业科学院,省部共建国家重点实验室培育基地,农业部植物保护与生物技术重点实验室,浙江省植物病毒重点实验室,浙江杭州310021
出 处:《生物技术通讯》2013年第5期677-681,共5页Letters in Biotechnology
基 金:国家自然科学基金(30900263);浙江省自然科学基金(LY12C14011);浙江省创新团队项目(2009R50032)
摘 要:目的:利用HPT-mCherry融合标签加速转基因筛选过程。方法:构建HPT-mCherry融合表达载体,采用农杆菌介导的转基因技术获得转基因植株,并利用荧光显微镜观察转基因愈伤和植株。结果:HPT-mCherry融合标签可用于转基因愈伤的筛选和转基因植株的鉴定;HPT与mCherry融合后互不影响,一方面可利用潮霉素抗性筛选愈伤,另一方面能通过观察mCherry红色荧光蛋白进行鉴定。结论:利用HPT-mCherry融合标签可以快速有效地鉴定并得到转基因阳性植株。Objective: To accelerat the transgenic screening process, the visualized label, a HPT-mCherry fusion marker was applied in this study. Methods: The plasmid with HPT-mCherry was introduced into japonica rice via Agrobacterium-mediated transformation. Red fluorescence was detected in transgenic callus and transgenic plants through fluorescence microscope. Results: The study indicated that HPT-mCherry fusion marker can be used as a double-function marker to idedtify transgienc plants. The function of HPT and mCherry has less affections on each other. Conclusion: The system based on HPT-mCherry fusion marker presented a high-efficient on transgen-ic material screening and identification.
关 键 词:农杆菌介导的转化 HPT—mCherry 筛选标记
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