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检 索 范 例 :范例一: (K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 范例二:J=计算机应用与软件 AND (U=C++ OR U=Basic) NOT M=Visual
作 者:孙蕾蕾[1] 肖雷雷[1] 肖波[1] 王伟英[1] 潘辰[1] 王世杰[2] 连宾[1]
机构地区:[1]江苏省功能微生物与功能基因组学重点实验室,江苏省微生物工程技术研究中心,南京师范大学生命科学学院,南京210023 [2]中国科学院地球化学研究所,环境地球化学国家重点实验室,贵阳550002
出 处:《中国科学:地球科学》2013年第11期1828-1846,共19页Scientia Sinica(Terrae)
基 金:国家自然科学基金项目(批准号:41173091);国家重大科学研究计划(编号:2013CB956702);江苏高校优势学科建设工程项目资助
摘 要:研究黑曲霉(Aspergillus niger)在含有可溶性钾(KCl)或只含有非可溶性钾(含钾硅酸盐矿粉)两种条件下风化含钾硅酸盐矿粉时碳酸酐酶(CA)和半胱氨酸合成酶(CysM)的基因表达差异.采用修改的Czapek培养基(用Na2HPO4替代K2HPO4)培养黑曲霉,设置A组(添加含钾矿粉不加KCl)和B组(加KCl不加含钾矿粉)两种处理方式.分别从A组和B组两种处理培养的黑曲霉菌丝体中提取mRNA,反转录后通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)对CA和CysM基因的转录表达进行相对定量.构建目的基因(CA和CysM)与内参基因(甘油醛-3-磷酸脱氢酶,GAPDH)的相对标准曲线,验证目的基因和内参基因扩增效率一致,从而能对目的基因表达进行相对定量.结果表明,A组条件下该菌的CA和CysM基因表达分别比B组条件下相应的基因表达上调了1.7倍和11.7倍(即A组是B组基因表达的2.7倍和12.7倍),对与这两种酶合成相关的黑曲霉风化含钾矿物可能的代谢途径与功能进行了分析.研究结果为进一步探讨黑曲霉在风化含钾矿物过程中的代谢调控作用提供了基础资料.
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