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检 索 范 例 :范例一: (K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 范例二:J=计算机应用与软件 AND (U=C++ OR U=Basic) NOT M=Visual
机构地区:[1]北华大学附属医院肛肠外科,吉林吉林132001 [2]北华大学附属医院神经内科 [3]吉林大学第一临床医院神经内科
出 处:《中国老年学杂志》2013年第22期5638-5640,共3页Chinese Journal of Gerontology
基 金:吉林省卫生厅科研课题(No.20122017)
摘 要:目的改造核心蛋白多糖基因(DCN)并构建真核表达载体,为进一步探讨DCN蛋白的肿瘤抑制作用奠定基础。方法以含有重组DCN的质粒pBluescript为模板采用聚合酶链式反应(PCR)扩增目的基因片段。真核表达载体pcDNA3.1及PCR产物经EcoRⅠ及XhoⅠ双酶切后连接,转化入大肠杆菌JM109中,获得重组载体pcDNA3.1-DCN/His(M-DCN),进行酶切鉴定和测序鉴定。结果 PCR获得目的片段(1 119 bp),重组载体pcDNA3.1-DCN/His经双酶切及测序证实,DCN的cDNA片段正确插入真核表达载体中。结论成功构建含有M-DCN基因的真核表达载体。
关 键 词:核心蛋白聚糖 聚合酶链式反应(PCR) 真核表达载体
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