赤羽病ELISA检测方法的建立及试剂盒的研制  

作　　者：王玉瑾 吴雯娟 张婷 吴绍精 陈勇 仲建忠 詹爱军 

机构地区：[1]江苏省新沂市畜牧兽医站,江苏新沂221400 [2]广东省深圳市检验检疫科学研究院,广东深圳518010

出　　处：《养殖与饲料》2013年第11期15-19,共5页Animals Breeding and Feed

基　　金："十二五"国家科技支撑项目(2012BAK17B08)

摘　　要：为了提高赤羽病的检测速度与效率,建立双抗夹心ELISA检测方法并进行试剂盒的研制。试验用纯化的AKV免疫BALB/c小鼠,细胞融合后用ELISA方法筛选出3株分泌抗AKV特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞(1D1、1B12和2G1),各杂交瘤细胞株均可以稳定地分泌特异性单克隆抗体,且其单克隆抗体亚型测定的结果均为IgG1、轻链均为κ链。建立DAS-ELISA检测方法,确定抗AKV单克隆抗体1B12株的最佳包被浓度为4μg/mL,多克隆抗体最佳稀释比为1∶500,二抗最佳工作浓度为1∶5 000,阴性/阳性结果判定临界值为0.238,具有较好的特异性,检测极限为10-4。表明该方法及试剂盒具有较强的实用价值。

关 键 词：赤羽病 阿卡斑病毒 单克隆抗体 DAS--ELISA 试剂盒 

分 类 号：S855.3[农业科学—临床兽医学]