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作 者:龚志云[1] 薛超[1] 张明亮[1] 吕晓强[1] 刘秀秀[1]
机构地区:[1]扬州大学江苏省作物遗传生理重点实验室,教育部植物功能基因组学重点实验室,扬州225009
出 处:《分子植物育种》2013年第6期736-740,共5页Molecular Plant Breeding
基 金:教育部霍英东教育基金会第十三届高等院校青年教师基金(131030);国家自然科学基金(30600345);江苏省高校自然科学研究计划资助项目(10KJB180009);省研究生科研创新计划(CXLX12_0922)共同资助
摘 要:蛋白免疫荧光(immunofluorescence,IF)分析是确定相关蛋白在染色体上具体位置的重要方法。本研究通过设计4种不同处理方式对水稻单倍体材料T2037的根尖染色体进行IF分析,发现4种处理方式对根尖染色体制备的效果不同。在没有酶解处理的条件下,经磷酸盐缓冲液(phosphate buffer solution,PBS)缓冲液保存的根尖比经过甲醇保存根尖的制片效果好,检测信号强;而酶解后的根尖染色体在两种不同处理方法下,染色体均有较重细胞质背景,检测信号弱。研究表明PBS保存材料且不进行酶解处理的根尖材料更适合于水稻染色体蛋白免疫分析。Protein Immunofluorescence (IF) analysis is an important method for determining related proteins on chromosome location. This work focused on influence on rice chromosome preparation by four different treatm- ents of root-tip in IF analysis. Without enzyme treatment, the result indicated the cytoplasm background of root- tips, preserved in PBS buffer, was weaker than that preserved in methanol. With enzyme treatment, chromosome morphology was poor in both preservation methods. The result showed that PBS to save material and no enzyme treatment were suitable for rice chromosome IF analysis.
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