嗜铬粒蛋白A衍生多肽CGA47-66CGA47酌抑制脓毒症血清所致血管内皮细胞高通透性的研究  

A study of inhibitory effect of chromogranin A derived peptide CGA47-66 on hyper-permeability of endothelium induced by serum of septic patient

作　　者：古妮娜[1] 张丹[1] 罗丽[1] 陈晓迎[1] 谢明[1] 刘景仑[1] 姜丽萍[1] 

机构地区：[1]重庆医科大学附属第一医院重症医学科,400016

出　　处：《中华危重病急救医学》2013年第12期715-719,共5页Chinese Critical Care Medicine

基　　金：国家自然科学基金（81071531）;重庆市自然科学基金（csTc2009BB5066）

摘　　要：目的观察嗜铬粒蛋白A衍生多肽CGA47-66（Chromfungin，CHR）对脓毒症患者血清引起的血管内皮细胞高通透性的影响。方法分别用CHR、脓毒性休克患者血清、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）作用于人脐静脉内皮细胞株EA．hy926，采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法、Transwell小室法测定EA．hy926的活性[吸光度（A）值]和通透性（A值），免疫荧光法镜下观察细胞纤维肌动蛋白（F—actin）的形态和分布。结果与空白对照组比较，1、10、100nmol／LCHR对EA．hy926细胞活性无明显影响（A值：1．219±0．253、1．179±0．065、1．179±0．062比1．306±0．162，均P〉0．05），而1000nmol/L CHR对EA．hy926细胞活性有显著抑制作用（A值：1．049±0．256比1．306±0．162，f=-2．390，P=0．031）。与空白对照组比较，1、10、100nmol/L CHR作用下EA．hy926细胞通透性明显降低（A值：1．619±0．324、1．496±0．356、1．132±0．280比2．315±0．440，P〈0．05或P〈0．01）；脓毒性休克患者血清或TNF—α单独作用下EA．hy926细胞通透性明显升高（血清组A值：1．204±0．248比0．277±0．017，P〈0．01；TNF-α组A值：2．485±0．113比1．602±0．679，P〈0．05）；1、10、100nmol／L的CHR既可明显降低脓毒性休克患者血清引起的高通透性（A值：0．299±0．065、0．224±0．028、0．131±0．015比1．204±0．248，均P〈0．01），也可明显降低TNF—α引起的高通透性（A值：1．995±0．394、1．920±0．096、1．744±0．475比2．485±0．113，P〈0．05或P〈0．01），且在1-100nmol／L范围内，CHR的上述作用呈现一定的剂量依赖性。与空白对照组比较，脓毒性休克患者血清或TNF-α单独作用下，F—actin细胞骨架发生明显重组和再分布，应力纤维形成增多，而CHR可以抑制上述变化的发生。结论CHR可以抑制脓毒性休克患者血清引起的血管内皮细胞的高通透性，且呈现一定的剂量依Objective To explore the role ofchromogranin A （CGA） derived peptide CGA47-66 （Chromfungin, CHR） on septic serum induced high permeability of vascular endothelial ceils. Methods Human umbilical venous endothelial cell line （EA.hy926 cells ） was exposed to CHR, serum of septic shock patient, and tumor necrosis faetor-α （TNF-α） respectively. Methyl thiazolyl tetrazolium （MTT） method, Transwell assay and immunofluorescence were performed to determine cell viability （absorbance （A） value], permeability of monotayer endothelial ceils （A value）, and the morphological characteristic and distribution of F-actin respectively. Results Compared with the blank control group, when EA.hy926 were exposed to CHR with 1, 10, 100 nmol/L the cell activity was not significantly affected （A value： 1.219 ± 0.253, 1.179 ± 0.065, 1.179 ± 0.062 vs. 1.306 ± 0.162, all P〉0.05）, while when the cells was exposed to CHR in 1 000 nmol/L the cell activity was significantly inhibited （A value： 1.049 ± 0.256 vs. 1.306 ± 0.162, t=-2.390, P=0.031 ）. Compared with blank control group, when the cells were exposed to CHR of 1, 10, 100 nmol/L a significant decrease in permeability in EA.hy926 cells was observed （A value： 1.619 ± 0.324, 1.496 ±0.356, 1.132 ± 0.280 vs. 2.315 ± 0.440, P〈0.05 or P〈0.01 ）. Treatment of septic shock patient＇s serum or TNF-α to EA. hy926 produced an obvious increase in its permeability （septic serum group A value： 1.204 ± 0.248 vs. 0.277 ± 0.017, P〈 0.01 ; TNF-α group A value ： 2.485 ± 0.113 vs. 1.602 ± 0.679, P〈 0.05 ）. High-permeability induced by TNF-α or septic shock patient＇s serum was alleviated by CHR in the concentration of 1, 10, 100 nmol/L in a dose-dependent manner （septic serum ＋ CHR group A value： 0.299 ± 0.065, 0.224 ± 0.028, 0.131 ± 0.015 vs. 1.204 ± 0.248; TNF-α ＋ CHR group A value ： 1.995 ± 0.394, 1.920 ± 0.096, 1.744 ± 0.475 vs. 2.485 ± 0.113, P〈0.05 or P〈0.01 ）. Under a laser scanning confocal m

关 键 词：嗜铬粒蛋白A 嗜铬粒蛋白A衍生多肽 血管内皮细胞 人脐静脉内皮细胞株EA hy926 内皮细胞通透性 脓毒症 

分 类 号：R459.7[医药卫生—急诊医学]