检索规则说明:AND代表“并且”;OR代表“或者”;NOT代表“不包含”;(注意必须大写,运算符两边需空一格)
检 索 范 例 :范例一: (K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 范例二:J=计算机应用与软件 AND (U=C++ OR U=Basic) NOT M=Visual
机构地区:[1]甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州730070 [2]中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃兰州730046
出 处:《中国兽医科学》2013年第12期1240-1245,共6页Chinese Veterinary Science
基 金:国家自然科学基金项目(31160510);甘肃省自然科学研究基金计划项目(1107RJZA198)
摘 要:为建立双标准曲线法荧光定量PCR检测方法,以PRNP为目标基因、β-actin为内参基因进行扩增,将扩增产物连入pMD18-T载体,获得阳性标准品进行定量扩增。并将MDV标准毒株MD5、疫苗株CV1988和1株野毒株接种CEF,收集不同日龄病变细胞以提取RNA,用以上方法进行扩增。把结果代入标准曲线公式进行计算,分析PRNP基因表达与MDV致瘤的相关性。结果显示,该方法能检测出的PRNP基因和β-actin基因的最低拷贝数为1×103,特异性和重复性较好。相对于对照组,接种3株毒株的PRNP的表达量都有明显的差异。表明MDV的感染对PRNP的表达量确实存在影响。据此推测PrPC对MDV的感染可能发挥着重要的生理功能。To develop double-standard curves method o{ RT-PCR, PRNP was used as target gene and /9-actin used as reference gene. The assay comprised of amplifying cDNAs template generated from viral RNAs of MDS,CV1988 and a wild stain, and establishment of standard curves using in vitro transcribed PRNP and jg-actin RNAs. The result showed that the test had a detection limit as low as 1 X 103 copies//xL with good specificity and repeatability. Compared with the control group,the expression of PRNP in the 3 strains had obvious differences. The result indicated that there was a relationship between MDV infection and expression levels of PRNP,and PrPC may play an important physiological role in MDV infection.
分 类 号:S852.659.7[农业科学—基础兽医学]
正在载入数据...
正在载入数据...
正在载入数据...
正在载入数据...
正在载入数据...
正在载入数据...
正在载入数据...
正在链接到云南高校图书馆文献保障联盟下载...
云南高校图书馆联盟文献共享服务平台 版权所有©
您的IP:216.73.216.127