同时检测猫细小病毒、杯状病毒、疱疹病毒1型多重PCR方法的建立  

Establishment of the multiplex PCR for detecting feline panleukopenia virus,feline calicivirus and feline herpesvirus-I

作　　者：王翀[1,2] 刘大飞[1,2] 刘春国[1] 柴洪亮[2] 张洪英[1] 程景[3] 吕健[4] 华育平[2] 曲连东[1] 

机构地区：[1]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨150001 [2]东北林业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨150040 [3]黑龙江省农产品质量检验检测中心,黑龙江哈尔滨150090 [4]国家知识产权局专利审查协作北京中心,北京100193

出　　处：《中国预防兽医学报》2014年第1期31-33,共3页Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine

基　　金：国家科技支撑计划(2013BAK11B00)

摘　　要：为建立检测多种猫科病毒的多重PCR方法,本研究参照GenBank中登录的猫细小病毒(FPV)的NS基因序列、猫杯状病毒(FCV)的ORF2基因序列以及猫疱疹病毒(FHV-I)的TK基因序列设计合成3对引物,通过对反应体系及条件的优化,建立了可以同时扩增FPV(392 bp)、FCV(922 bp)和FHV-I(290 bp)的多重PCR方法。该检测方法结果表明:在同一PCR反应体系中可以同时检测出以上3种病毒,FPV、FCV和FHV的最低检出限分别为101.5TCID50、101.9TCID50和101.2TCID50。以该方法对黑龙江省各地区收集的120份血清进行检测,其中FPV、FCV和FHV-I的阳性率分别为5%(6/120)、2.5%(3/120)和4.1%(5/120),证明该方法可以用于3种病毒的检测,具有良好的特异性和敏感性。To establish a method for simultaneous detection of feline panleukopenia virus （FPV）, feline calicivirus （FCV） and feline herpesvirus-I （FHV-I）, a multiplex PCR was developed with a set of specific primers designed based on the conserved sequences within NS of FPV, ORF2 of FCV and TK of FHV-I. Under the optimized conditions of multiplex PCR, three special fragments for FPV （392 bp）, FCV （922 bp） and FHV-I （290 bp） were amplified with a detection limit of 1015 TCID50, 10I9 TCID50 and 1012 TCID50, respectively. Thirty clinical samples of affected dogs from different areas of Heilongiiang province were detected by the multiplex PCR, and detection rate was 5% （6/120） for FPV, 2.5% （3/120） for FCV and 4.1% （5/120） for FHV-I respectively, which indicated that the multiplex PCR for detecting FPV, FCV and FHV-I was rapid, specific and sensitive, and could be used in clinic diagnoses.

关 键 词：猫细小病毒 猫杯状病毒 猫疱疹病毒 多重PCR 

分 类 号：S852.65[农业科学—基础兽医学]