双链RNA快速小量提取法在水稻dsRNA病毒病诊断中的应用  

Application of Rapid Small Extraction Method on Detecting Rice dsRNA Viruses

作　　者：郭灵芳[1] 刘小娟[2] 吴祖建[2] 章松柏[3,2] 

机构地区：[1]长江大学工程技术学院,湖北荆州434020 [2]福建农林大学植物病毒研究所,福建福州350002 [3]长江大学农学院,湖北荆州434025

出　　处：《贵州农业科学》2014年第1期26-28,共3页Guizhou Agricultural Sciences

基　　金：国家自然科学基金青年基金项目"水稻条纹病毒与寄主植物翻译延伸因子1A的互作研究"(31301638);长江大学工程技术学院教研项目"独立学院仪器分析设计性实验教学的研究与实践"(JY201229)

摘　　要：水稻病毒病是水稻生产中重要的病害，目前国内流行的水稻病毒病病原多为 dsRNA病毒，每一种dsRNA病毒都有特异性基因图谱，为此，探讨了双链RNA快速小量提取法在水稻dsRNA病毒病诊断中的应用。结果表明：1）双链RNA快速小量提取法可以从0．5～0．8 g的水稻组织中快速提取 dsRNA，在3 h内完成对样品的鉴定，提取产物可以直接应用于dsRNA的检测、分类以及相关基因的克隆；2）提取效率较传统方法高，以 SRBSDV为例，传统 dsRNA提取方法中 dsRNA的产率为0．15～0．3μg/g，该方法中dsRNA的产率茎组织达到3μg/g以上，叶组织0．1～0．5μg/g；3）该方法也可以应用于介体体内的dsRNA病毒基因组核酸的提取。Rice virus disease was an important disease in rice production,most of them were dsRNA viruses with characteristic dsRNA genome profiles.Based on that,the rapid small extraction method was explored to apply in the diagnosis of dsRNA viruses of rice disease.Results：1）by the method,0.5~0.8 g sample was required to rapidly extract dsRNA within 3 h,and the dsRNAs could be directly used to the detection and classification of dsRNA viruses and the clone of related genes;2）The extraction efficiency was higher than traditional method,taking SRBSDV as an example,the productive rate of dsRNA was 0.15~0.3μg/g,while it was more than 3μg/g from stem tissue and 0.1~0.5μg/g from leaf tissue by the rapid small extraction method;3）The method could also be used to the dsRNAs extraction from insect vectors.

关 键 词：dsRNA病毒 快速小量提取法 水稻 

分 类 号：S432.41[农业科学—植物病理学]