重组新疆出血热病毒S和M基因疫苗诱导小鼠免疫应答的评价  

作　　者：李阳[1] 刘东亮[1] 汪梅芳[1] 武勇凯 王咏星[1] 李轶杰[1] 彭倩[1] 马洁[1] 杨建华[1] 孙素荣[1] 

机构地区：[1]新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2014年第4期403-406,共4页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：国家自然科学基金(81060129);科技部基础性工作专项重点项目计划(2013FY11350);新疆生物资源基因工程重点实验室开放课题(XJDX020l-201l-01);新疆大学大学生创新训练计划项目(201341)

摘　　要：目的选取新疆出血热病毒M基因（编码糖蛋白Gn,Gc）和S基因（编码核蛋白NP）部分基因片段,并进行部分片段的嵌合,分别插入至真核表达载体PVAX1中构建重组质粒,并将重组质粒分别免疫小鼠,评价其诱导的体液和细胞免疫应答的效果。方法将NP（aa1~482）、NP2（aa170~305）和糖蛋白Gn（aa529~820）、Gc（aa1050~1697）片段,及Gc-NP2片段分别构建到真核表达载体PVAX1上构建重组质粒,用重组质粒免疫小鼠,通过T细胞增殖试验,细胞因子含量测定和ELISA对免疫效果进行评价。结果经双酶切鉴定和DNA测序证实重组质粒构建正确。pVAX1-NP2实验组小鼠的血清抗体效价可以达到1∶6 400,pVAX1-NP2及pVAX1-Gc-NP2实验组小鼠脾脏T淋巴细胞增殖明显,两组的IFN-γ的表达水平也高达（865.15±6.29）pg/mL及（1727.21±33.93）pg/mL,与对照组相比,差异具有统计学意义（P〈0.01）。pVAX1-NP2及pVAX1-Gn实验组IL-4的表达水平为（19.11±1.20）pg/mL和（20.07±1.67）pg/mL,都显著高于对照组的（9.35±1.82）pg/mL（P〈0.05）。结论成功构建了多个重组真核表达载体,免疫小鼠后获得了效价高,特异性好的抗体。各重组质粒都激起了较强的体液免疫及细胞免疫,pVAX1-NP2及pVAX1-Gc-NP2实验组效果最好,可将其作为新疆出血热病毒的候选疫苗。

关 键 词：新疆出血热病毒 基因免疫 基因疫苗 

分 类 号：R512.8[医药卫生—内科学] R392.7[医药卫生—临床医学]