小麦黄花叶病毒编码VPg蛋白N端结构是VPg与核仁蛋白Fibrillarin互作区域  

N-terminal domain of VPg encoded by Wheat yellow mosaic virus is involved in the interaction with the nucleolar protein Fibrillarin

作　　者：边靓 向荣[2] 孙丽英[2] 陈剑平[2] 

机构地区：[1]浙江师范大学化学与生命科学学院,浙江金华321004 [2]浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所/浙江省植物有害生物防控国家重点实验室培育基地/农业部植物保护与生物技术重点开放实验室/浙江省植物病毒重点开放实验室,浙江杭州310021

出　　处：《浙江农业学报》2014年第1期89-94,共6页Acta Agriculturae Zhejiangensis

基　　金：农业部小麦产业体系病虫害防控(CARS-3-1-14);农业部转基因小麦新品种培育子课题(2011ZX08002-001);"现代农业生物技术与作物病害防控"--浙江省高校重中之重学科建设;浙江省植物病毒与组培产业重点领域创新团队(2009R50032)

摘　　要：小麦黄花叶病毒(Wheat yellow mosaic virus,WYMV)属于马铃薯Y病毒科大麦黄花叶病毒属成员,其基因组是由两条正义单链RNA组成,共编码10个蛋白。其中,VPg(Viral protein genome-linked)作为病毒末端结合蛋白,与病毒基因组RNA 5’端共价连接。利用软件分析WYMV VPg蛋白氨基酸序列发现其N端具有核定位信号(NLS)序列,C端具有核输出信号(NES)序列。通过激光共聚焦显微镜观察VPg与GFP融合蛋白在烟草细胞中的表达情况发现,GFP-VPg主要定位于细胞核中。利用eYFP(n)标记核仁结构蛋白Fibrillarin与VPg进行双分子荧光互补实验发现,VPg与Fibrillarin互作且定位于细胞核中。根据VPg结构特点构建一系列缺失突变体与Fibrillarin的互作实验验证了它们之间的互作区域发生在N端NLS区域。Wheat yellow mosaic virus （ WYMV ） is a member of the genus Bymovirus in the family Potyviridae. WYMV has two single-stranded positive sense RNA genomes which produce 10 viral proteins .Among those proteins , viral genome-linked protein （ VPg） , which binds to the 5′end of the viral RNA genome , is predicted to contain a nuclear localization signal （NLS） and nuclear export signal （NES） in the N-and C-terminal portions, respectively. WYMV（ Wheat yellow mosaic virus） VPg fused to C-terminus of enhanced green florescent protein （ eGFP-VPg） ex-clusively accumulated in the nucleus of epidermal cells of Nicotiana benthamiana plants.Fibrillarin, a nucleolus res-ident protein, was introduced into eYFP（n） plasmid.To investigate the regions of the VPg domain binding fibrilla-rin, a series of VPg mutant and fibrillarin performed BiFC assay .The result display VPg localized and interact with fibrillarin in the nucleus .NLS but not NES is required for interact with fibrillarin .

关 键 词：小麦黄花叶病毒 VPg蛋白 细胞核定位 Fibrillarin蛋白 蛋白质互作 

分 类 号：S435.12[农业科学—农业昆虫与害虫防治]