A1位PEG化的重组人胰岛素类似物的制备和鉴定  

Preparation and Characterization of Position A1 PEG-modified Recombinant Human Insulin Analogue

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作  者:刘立平[1] 曹宇 蔡晓娜[1] 贺晓强[1] 范开[1,2] 

机构地区:[1]重庆理工大学药学与生物工程学院,重庆400054 [2]重庆富进生物医药有限公司,重庆400041

出  处:《重庆理工大学学报(自然科学)》2014年第2期49-53,91,共6页Journal of Chongqing University of Technology:Natural Science

基  金:国家"重大新药创制"科技重大专项(2009ZX09103683)

摘  要:在pH值为8.0的条件下用分子量20 kD的单甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺丙酸酯(mPEG-succinimidyl propionate,mPEG-SPA)特异性地修饰到去B链第30位氨基酸的重组人胰岛素类似物(DET)的A链第一位氨基酸甘氨酸上,经过阳离子Source 30Q层析得到一种纯度大于90%的PEG化重组人胰岛素类似物(PEG-DET-A1)。经SAX-HPLC、质谱、质量肽图对PEG-DET-A1进行鉴定,确认了单甲氧基聚乙二醇修饰在DET的A链第一位氨基酸甘氨酸,PEG-DET-A1结构正确,为研制一种长效胰岛素奠定了基础。Under the conditions in pH = 8.0, a 20 kD mPEG-SPA attached to GlyA1 of human insu- lin analogues with deletion of ThrB30( D30), and after purification by Source 30Q, we get an adjunct modified by PEG ( PEG-DET-A1 ). SAX-HPLC, Mass Spectrometric Peptide Mapping Analysis and MALDI-TOF MS all proved that a single PEG modified insulin analogues have been developed at the position 1 Gly of chain A. The structure of PEG-DET-A1 is correct which provides the foundation of long-acting insulin.

关 键 词:人胰岛素 重组人胰岛素 聚乙二醇修饰 

分 类 号:Q78[生物学—分子生物学]

 

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