番茄抗白粉病必需基因ShGSTU1原核表达条件优化  

Optimization of Prokaryotic Expression of ShGSTU1 Gene in Tomato Resistant to Powdery Mildew

作　　者：裴冬丽[1] 张红岩[1] 李萌[1] 段自磊 李成伟[2] 

机构地区：[1]商丘师范学院生命科学学院植物与微生物互作重点实验室,河南商丘476000 [2]周口师范学院生命科学学院植物遗传与分子育种重点实验室,河南周口466001

出　　处：《河南大学学报（自然科学版）》2014年第2期202-207,共6页Journal of Henan University:Natural Science

基　　金：国家自然科学基金(31071807);河南省教育厅科技项目基金(13B210199)联合资助

摘　　要：采用RT-PCR技术从番茄中扩增谷光甘肽转移酶基因ShGSTU1,构建该基因的原核表达载体pET28aShGSTU1和pET32a-ShGSTU1,并对重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中表达条件进行优化,主要对诱导温度、诱导时间及诱导剂浓度进行分析.结果表明:重组蛋白在表达载体pET28a中的最佳表达条件为1mmol/L IPTG,37℃诱导4h;在表达载体pET32a中的最佳表达条件为1mmol/L IPTG,30℃诱导5h.Tomato ShGSTU1 gene was amplified by reverse transcription PCR, then prokaryotic expression vector pET32a-ShGSTU1 and pET28a-ShGSTU1 were constructed and the prokaryotic expression conditions in Escherichia coli BL21 （DE3） were optimized including induction temperature, induction time and induction concentration of IPTG. The results showed that the optimal expression conditions of recombinant pET28a vector is 1 mmol/L IPTG induction at 37℃ for 4 h, while pET32a vector is 1 mmol/L IPTG induction at 30℃ for 5 h.

关 键 词：谷光甘肽转移酶 白粉病 番茄 原核表达 

分 类 号：Q555[生物学—生物化学]