结核分枝杆菌脂阿拉伯甘露聚糖的提纯及活性初步鉴定  被引量:1

Purification and Identification of Mycobacterium tuberculosis Lipoarabinomannan

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作  者:戴振华[1] 郭兰芹 冯晓燕[1] 张立[3] 郄霜[1,4] 杨锡琴[1] 修冰水[1] 陈堃[1] 彭瑞云[5] 张贺秋[1] 

机构地区:[1]军事医学科学院基础医学研究所,北京100850 [2]华北石油总医院,河北任丘062552 [3]天津海河医院,天津300350 [4]河北联合大学,河北唐山063000 [5]军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京100850

出  处:《生物技术通讯》2014年第2期230-233,共4页Letters in Biotechnology

基  金:"十一五"国家科技重大专项(20092X10004-718)

摘  要:目的:提取纯化结核分枝杆菌(MTB)脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)。方法:MTB菌体彻底破碎后,去脂,去蛋白,上清液经苯酚萃取,酒精沉淀,得到LAM;以提取的LAM作为包被抗原检测血清中的LAM抗体。结果和结论:提取到LAM抗原,免疫印迹表明,LAM迁移范围相对分子质量为25x10^3-40x10^3,主要集中在35x10。处。在64例肺结核患者中,有43例LAM-ELISA检测阳性(敏感性为67.19%);在67例健康志愿者中,有64例LAM-ELISA检测阴性(特异性为95.52%)。Objective: To extract and purify lipoarabinomannan (LAM) from Mycobacterium tuberculosis (MTB). Methods: The MTB was crashed. The lipids and protein were removed, the supernatant was harvested and extract ed with phenol, and precipitated with ethanol, and LAM was obtained. Results & Conclusion: LAM antigen is prepared successfully. By Western blots, the obtained LAM migration was in the range 25-40 kDa, mainly concen trated in the 35 kDa place. Of the 64 tuberculosis patiens, 43 were positive using the LAM-ELISA(sensitivity 67.19%). Of the 67 healthy volunteers, 64 were negative using the LAM-ELISA(specificity 95.52%).

关 键 词:结核分枝杆菌 脂阿拉伯甘露聚糖 提纯 

分 类 号:Q502[生物学—生物化学]

 

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