环介导等温扩增技术的引物设计与筛选研究  

Study on Primer Design and Screening of Loop-mediated Isothermal Amplification

作　　者：王德国[1] 王永真[2] 王爱萍[3] 

机构地区：[1]许昌学院食品与生物工程学院河南省博士后研发基地,河南许昌461000 [2]许昌学院公共实验中心,河南许昌461000 [3]郑州大学生命科学学院,河南郑州450000

出　　处：《安徽农业科学》2014年第11期3166-3168,共3页Journal of Anhui Agricultural Sciences

基　　金：国家自然科学基金项目(No.31172331和No.U1204330);河南省高等学校青年骨干教师资助计划项目(No.2012GGJS-172);许昌学院杰出青年骨干人才培养计划项目

摘　　要：[目的]研究引物设计与非特异扩增之间的关系.[方法]以单核细胞增生李斯特菌（Listeria monocytogenes）的特异性基因hlyA与沙门氏菌（Salmonella）的特异基因invA为例设计引物,进行环介导等温扩增.[结果]就环介导等温扩增的任何2条引物而言,如果2条引物3’端的3～4碱基在同一条引物上都有2个互补序列,在常用的LAMP反应体系与反应条件下,必然有非特异性扩增,LAMP引物设计与筛选应避免这种情况出现.[结论]按照该试验的原则设计引物,可降低非特异性扩增.[Objective] To study relationship between primer design and non-specific amplification.[Method] With specific gene hlyA of Listeria monocytogenes and specific gene invA of Salmonella as examples,loop-mediated isothermal amplification （LAMP） was conducted.[Result] As far as any two primers of LAMP primers were concerned,there should be non-specific amplification if 3-4 bases at 3＇ end of both primers had two complementary sequences on a same primer,LAMP primers should be designed and screened to avoid such situation.[Conclusion] LAMP reaction did not have non-specific amplification with primers designed according to above principle.

关 键 词：环介导等温扩增(LAMP) 引物设计 非特异性扩增 

分 类 号：S188[农业科学—农业基础科学] Q81[生物学—生物工程]