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作 者:傅春燕[1] 蒋虹[1] 薛婧[1] 丛喆[1] 陈霆[1] 魏强[1]
机构地区:[1]北京协和医学院比较医学中心、中国医学科学院医学实验动物研究所、卫生部人类疾病比较医学重点实验室、国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室,北京 100021
出 处:《中国比较医学杂志》2014年第5期10-14,共5页Chinese Journal of Comparative Medicine
基 金:国家自然科学基金(81301437)
摘 要:目的研究人单核巨噬细胞株U937的90K/Mac-2BP基因沉默后其mRNA和蛋白水平的表达及其对HIV-1感染单核巨噬细胞凋亡的影响。方法用人单核巨噬细胞株U937作为细胞模型,用R5嗜性的HIV-1全长感染性质粒包装并获得HIV-1病毒,待HIV-1感染U937细胞5 d后,细胞经PE-Annexin V,PerCP-7-AAD染色,用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。采用基因沉默技术,将U937细胞中的90K/Mac-2BP基因沉默后,再经HIV-1感染,5 d后检测细胞凋亡情况。结果正常人单核巨噬细胞株U937,经HIV-1感染后细胞凋亡率为(16.27±0.30)%,而90K/Mac-2BP基因沉默后的U937细胞,经HIV-1感染后细胞凋亡率分别增加至(31.26±0.35)%、(25.76±0.30)%、(23.69±0.33)%,具有统计学差异(P<0.05)。结论 90K/Mac-2BP的表达水平能调节HIV-1感染的单核巨噬细胞凋亡。Objective To investigate the effect of cell death by HIV-1 infection on gene 90K/Mac-2BP by RNA interference (RNAi) in U937 cell line.Methods We used human monocyte-macrophage cell line U937 as the cell model.Cells were infected by HIV-1 ( R5-tropic) 5 days, and then stained by PE-Annexin V and PerCP-7-AAD.90K/Mac-2BP in U937 cell line was knocked down , and these cells were infected by HIV-1 for 5 days.Then, cells were stained by PE-AnnexinV and PerCP-7-AAD.Apoptosis were examined upon flow cytometry .Results The percentages of Annexin V+cells without 90K/Mac-2BP knock-down were (16.27 ±0.30)% by HIV-1 infection.The percentages of them with 90K/Mac-2BP knock-down were (31.26 ±0.35)%, (25.76 ±0.30)%, (23.69 ±0.33)% respectively.The increase&amp;nbsp;of cell apoptosis rate for HIV-1-infected U937 cells by 90K/Mac-2BP siRNA transfection was significantly greater than that for HIV-1-infected untreated cells (P﹤0.01).Conclusion The apoptosis of HIV-1-infected U937 cells was regulated by the expression of 90K/Mac-2BP.
关 键 词:人单核巨噬细胞株 巨细胞-2结合蛋白 HIV-1 凋亡
分 类 号:R332[医药卫生—人体生理学]
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