ANKIB1相关泛素结合酶的筛选  

Screening of ANKIB1 Associated Ubiquitin-conjugating Enzymes

作　　者：马振玲[1] 解博红[2] 刘世饶[1] 杨子善[1] 谢云飞[1] 

机构地区：[1]新乡医学院生命科学技术学院河南省遗传性疾病与分子靶向药物高校重点实验室培育基地,河南新乡453003 [2]新乡医学院基础医学院,河南新乡453003

出　　处：《中国生物化学与分子生物学报》2014年第6期617-622,共6页Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology

基　　金：新乡医学院研究生科研创新支持计划(No.YJSCX201230Y)资助~~

摘　　要：含锚蛋白重复和IBR结构域蛋白1(ankyrin repeat and IBR domain-containing protein 1,ANKIB1)属于RING-IBR-RING(RBR)蛋白家族,也是该家族中唯一含有泛素结合模体的成员,能促进某些蛋白的泛素化.几乎所有的RBR蛋白都具有泛素连接酶(E3)活性.ANKIB1也被推测为一种E3,但迄今尚未证实.RBR型E3能够与多种泛素结合酶(ubiquitin-conjugating enzyme,Ubc,统称E2)互作并发挥催化作用,其中最常见的是UbcH7,UbcH8和UbcH5B次之.为了筛选ANKIB1相关的E2,本研究在大肠杆菌BL21(DE3)中分别表达了UbcH5B、UbcH7和UbcH8蛋白,并采用GST沉降(GST pull-down)实验验证3种E2与ANKIB1的相互作用.实验结果表明,内源性及过表达的ANKIB1均能与UbcH5B、UbcH7或UbcH8相互作用,同时ANKIB1也是唯一能与这3种E2互作的RBR蛋白.本研究为ANKIB1可能是1种E3的假说提供了支持,并为后续研究ANKIB1的E3活性和催化机制提供了线索.

关 键 词：含锚蛋白重复和IBR结构域蛋白1 泛素结合酶 GST沉降 蛋白质相互作用 

分 类 号：Q291[生物学—细胞生物学] Q71