利用EBV转化人类外周血B淋巴细胞获得永生化细胞株保存人类全基因组  

作　　者：韦勇 

机构地区：[1]广西区江滨医院检验科,广西南宁530021

出　　处：《世界最新医学信息文摘》2013年第29期158-159,170,共3页World Latest Medicine Information Electronic Version

摘　　要：人类外周血 B 淋巴细胞可以被 EBV 在适当的体外环境中转化成具有永生化特征的 LCL。保存了各人的完整基因组，且其生化和分子生物学特征不发生变化。环孢霉素 a 法是建立珍贵样本的 LCL 的首选方法。采血12到36小时分离转化 B 淋巴细胞，转化液中添加 cysA、pha，控制转化时细胞数量在10/ml 数量级有助于提高建株率。37℃5%二氧化碳恒温培养，及时添加新鲜的RPMI 1648培养液以及全程无菌操作防止细菌真菌污染至关重要。慢冻迅速升温是冻存、复苏的关键。原代和继代之间 G 条带分析、核型对比、对常见变异位点应用 PCR 进行质控有助于发现 LCL 的细胞变异。

关 键 词：EBV转化 B淋巴细胞 LCL 

分 类 号：R446[医药卫生—诊断学]