鸭梨PPO与GFP融合基因的烟草转化及亚细胞定位观察  

Transformation of tobacco plants by Yali PPO-GFP fusion gene and observation of subcellular localization

作　　者：齐靖[1] 李桂琴[1] 董祯[2] 周薇[1] 

机构地区：[1]河北经贸大学生物科学与工程学院,石家庄050061 [2]河北女子职业技术学院,石家庄050091

出　　处：《广西植物》2014年第3期369-374,共6页Guihaia

基　　金：河北省科技计划项目(11220103D-9);河北省高等学校科学技术研究指导项目(Z2012065);河北省高等学校科学研究计划重点项目(ZH2011126)

摘　　要：将鸭梨PPO基因与绿色萤光蛋白GFP基因相融合共同进行遗传转化的方式,对鸭梨多酚氧化酶开展细胞定位研究。通过克隆该酶基因除终止密码子TAA外长度为1 779bp的CDS序列,与绿色荧光蛋白基因重组构建了荧光表达载体pBI121-PPO-GFP,借助农杆菌转化烟草,转基因烟草叶片细胞经激光扫描共聚焦显微镜观察,绿色荧光蛋白荧光与叶绿体自发荧光相重合。结果表明鸭梨多酚氧化酶为叶绿体蛋白质。To explore the subcellular localization of Polyphenol oxidase（PPO）fromPyrus bretschneideri,the 1 779 bp cDNA of PPO gene was cloned and fused with GFP in frame to construct a binary vector pBI121-PPO-GFP.Then,the binary vector was transformed into Nicotiana tabacum by the tumefanciens-mediated method.Using confocal laser scanning microscopy,green fluorescent signals were localized in chloroplasts of the transformed Nicotiana tabacum cell.This results suggested that the Polyphenol oxidase from Pyrus bretschneideri was a chloroplast protein.

关 键 词：鸭梨 多酚氧化酶 绿色荧光蛋白 基因融合 遗传转化 亚细胞定位 

分 类 号：Q942.6[生物学—植物学]