GOD转基因酵母菌的构建及其重组GOD的纯化与活性分析  

作　　者：刘旻[1] 

机构地区：[1]兰州理工大学生命科学与工程学院

出　　处：《中国食品工业》2014年第5期58-60,共3页China Food Industry

摘　　要：葡萄糖氧化酶（GOD）被广泛应用于食品工业、医学诊断试剂等。目前葡萄糖氧化酶生产主要采用的发酵体系，大多数属于胞内表达存在生产成本偏高，且产出蛋白有杂质使产品纯度不够高等问题。因此，如何构建优良的GOD产生菌株，并让它有效的高表达，具有重要意义。本实验用Sacl内切酶鉴定所保存的质粒是否正确，克隆的真核分泌型表达载体质粒pPIC9K—His—GOD转化大肠杆菌，提取重组质粒pPIC9K—His—GOD并纯化质粒。用pPIC9K—His—GOD用BlgII内切酶线性化，电转毕赤酵母菌GS115，用PCR法鉴定其基因组中是否转化成功。将得到的预期菌种做发酵表达，SDS-PAGE检测蛋白表达结果。

关 键 词：GOD SDS—PAGE pPIC9K—His—GOD 毕赤酵母GS115 大肠杆菌DH5α 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学]