细菌质粒提取方法的研究  

The Study on Improving Method of Extracting Bacteria Plasmid

作　　者：单斌[1] 陈端[1] 骈淮燕[1] 荀云珍[1] 

机构地区：[1]昆明医学院第一附属医院检验科,昆明650032

出　　处：《昆明医学院学报》2001年第1期42-44,共3页Journal of Kunming Medical College

基　　金：云南省科委应用基础研究基金!资助项目 (93C0 86 )

摘　　要：为建立一种革兰氏阴性及阳性菌均能分析的质粒提取方法 ,以Biswajitsaha的方法为基础 ,对比酸酚法、热变性法、碱变性法、酶法等方法 ,研制符合国内一般实验室的方法 .结果 :按Biswajitsaha法Ecol iv5 17的 8条带在本实验室条件下不能完全检出 ,但自研方法重复 12次均能检出 ,且与标准蛋白Marker的分子量相符合 .另取临床分离菌株 ,金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌各 30株 ,均检出 ,最大质粒分子量检出 186 3kb ,最小分子量检出 1 1kb ,3次重复检测质粒谱均相同 .结果表明 :改良质粒提取方法适用于革兰氏阴性及阳性菌大小分子量的质粒提取 ,便于在一般实验室推广使用 .Objective To establish a simple,accurate and practical method of extracting plasmid from gram-negative and gram-positive bacteria,Method we selected,Biswajit sahas method and comported others method, such as controlling pH andtemperature strictly and increasing EDTA-Na 2 capacity. Result The eight strips of Ecliv 5l7 can not be found completely in original method, but can be found in our one.We found the largest plasmid molecular weight was l86 3?kb, and the minimum was l l?kb from each 30 strains STA, EC, PA. Plasmid profile is alike through repeating experiment three times. Conclusion:The method can be widely used in extracting bacteria plasmid and fit gram-negative and gram-positive bacteria whenever molecular weight max or min. These conditions can be obtained in general laboratory.

关 键 词：质粒 革兰氏阴性菌 革兰氏阳性菌 分子量 

分 类 号：R446.5[医药卫生—诊断学]