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作 者:李旭刚[1] 路子显[1] 冯德江[1] 朱祯[1]
出 处:《自然科学进展(国家重点实验室通讯)》2001年第4期368-373,共6页
基 金:国家"八六三"高技术计划(批准号:Z-17-01-01;BH-02-01-01);国家自然科学基金(批准号:39989001);国家转基因植物研究与产业化开发专项基金(批准号:ZJY-B-01)
摘 要:构建了一个适合农杆菌介导转化的双元T-DNA载体.载体pCNPT-Ⅱ含有与LacZ相连的多克隆位点,其分子量比常用的pBin19载体小了2.6 kb.多克隆位点靠近T-DNA的右边界,植物选择标记基因新霉素磷酸转移酶基因靠近T-DNA的左边界,当T-DNA从右边界向左边界依次转移时,使外源基因应先于选择标记基因整合进植物基因组,可以避免产生无外源目的基因的转化植株.以β-葡糖醛酸酶基因作报道基因构建了植物表达载体pCNPT-HGUSA,经农杆菌介导转化了烟草.分子检测表明,在外源目的基因与选择标记基因共整合的频率上,pCNPT-Ⅱ构建的植物表达载体强于pBin19来源的pB1121.
关 键 词:双元载体pCNP-Ⅱ 农杆菌 β-葡糖醛酸酶 pBin19 介导转化 双元粒载体 植物基因工程 植物表达载体
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