检索规则说明:AND代表“并且”;OR代表“或者”;NOT代表“不包含”;(注意必须大写,运算符两边需空一格)
检 索 范 例 :范例一: (K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 范例二:J=计算机应用与软件 AND (U=C++ OR U=Basic) NOT M=Visual
机构地区:[1]华西医科大学附一院肝炎研究室,成都610041
出 处:《中国免疫学杂志》2001年第5期236-238,243,共4页Chinese Journal of Immunology
基 金:国家自然科学基金! (项目号 396 70 6 70 );四川省科委九五攻关重大项目及省计委科研基金资助
摘 要:目的 :建立乙型肝炎病毒表面抗原M蛋白的单克隆真核表达细胞株。方法 :利用磷酸钙法将前期所构建的质粒pRc/CMV S2 S导入小鼠骨髓瘤细胞SP2 / 0 ,用G418抗性筛选以获得单克隆细胞株 ,用点免疫、ELISA、Western印迹法分别检测目的蛋白的表达情况。结果 :获得 4株具有G418抗性的单克隆细胞株SP2 / 0 S2 S ,且在转染细胞株中检出了乙肝病毒表面抗原 ,优化了该过程中的实验条件。结论Objective:To construct a monoclone cell line expressing M-HBsAg.Methods:Transfected SP2/0 with pRc/CMV-S 2S by Calcium Phosphate Method,selected the cells by G418,detected HBsAg by Dot-blot、ELISA and Western-blot hybridization.Results:By selection of G418,G418 resistent cells were obtained;tests of Western-blot hybridization and ELISA demonstrated their expression of aimed protein.Conclusion:Monoclone Cell Lines of SP2/0-S 2S were obtained.
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