人生长激素基因在昆虫细胞中的表达  

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作  者:耿朝晖[1] 余慕贞[2]  

机构地区:[1]南开大学生化系,中国天津300071 [2]中科院动物所,中国北京100080

出  处:《Developmental and Reproductive Biology》1998年第1期33-40,共8页发育与生殖生物学报(英文版)

摘  要:近年发展起来的昆虫细胞-杆状病毒基因工程系统具有良好的优越性:(1)表达产量高,(2)产物的免疫原性、功能性类似于天然产物,(3)适用于悬及无血清培养。本实验中,将外源基因hGH克隆至质粒pVL1393,形成转移载体pVL1393/hGH(Fig.1&2)。与昆虫核多体病毒AcNPV基因组DNA转染秋粘虫细胞Sf9(Fig.3),pV1393/hGH与AcNPV基因组DNA发生同源重组,取代多角体蛋白基因。经空斑分析纯化得到不含多角体,单一表达的重组病毒rAcVhGH(Fig.4),感染滴度达到2.03×10^8PUF/mL。经反复实验,10^5细胞/mL感染6-7天后收获培养上清液,可得到表达量为40μg/mL的hGH蛋白(Fig.5,6&7)。

关 键 词:人生长激素基因 昆虫细胞 基因表达 

分 类 号:Q785[生物学—分子生物学] Q575.11

 

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