cGH Gene Transfer and PCR Detection in Crucian Carp  

鲤鱼生长激素基因在鲫鱼中的基因转移及PCR检测

作　　者：赵晓祥[1] 张淑梅[1] 李晶[1] 李荣萍[1] 杨志兴[1] 

机构地区：[1]黑龙江省科学院应用微生物研究所

出　　处：《Developmental and Reproductive Biology》1996年第2期34-40,共7页发育与生殖生物学报（英文版）

摘　　要：By inserting the CMV with HSV TK promoter into the plasmid pBlue-cGH which contained cGH gene, a chimeric expression vector was constructed for transgenic fish. After the vector was transferred into fertilized eggs of crucian carp by means of microinjection, the transgenic crucian carp was obtained. The result of PCR detection showed that the growth hormone gene of the exogenous carp was integrated into the genome of crucian carp, and the transgenic crucian carp displayed enhancement of its growth.鲫鱼群体内，个体之间的生长速度差别不大，遗传保守性较强，用常规育种方法很难获得生长速度快、个体差异较大的后代。通过基因转移技术，将外源基因如鱼的生长激素基因导入鱼的受精卵中，而获得转基因鱼是鱼类定向育种的一条有效途径。已有报道，在虹蹲鱼生长激素ｃＤＮＡ上游连结一个病毒启动子构建成表达质粒，由此获得的转基因鲤鱼比对照生长速度快２０％。但是未见有将鲤鱼生长激素基因导入鲫鱼受精卵的报导。我们克隆了鲤鱼生长激素基因，并用它构建了含有病毒启动子（Ｆｉｇ．１，插入片段为０．８Ｋｂ，位于ＸｂａＩ和ＰｓｔＩ之间）的表达质粒（Ｆｉｇ．２，命名为ｐＣＭＶ－ＴＫ－ＣＧＨ）。用该质粒对鲫鱼受精卵进行注射，共注射了１０００粒卵，获得了转基因实验鲫鱼４８０尾，孵化率为４８％。将其中１００尾幼鱼于水簇箱中进行放养。选择其中个体较大的５０尾进行ＰＣＲ（检测。其中８条鱼的基因组ＤＮＡ有０．６Ｋｂ的ＰＣＲ扩增产物（Ｆｉｇ．３），表明其上整合有外源的鲤鱼生长激素基因，其整合率为１６％。其中最大的一条体重４．２ｇ，体长６ｃｍ，比对照（０．７ｇ，４ｃｍ）体重增加５倍，体长增加２ｃｍ（Ｆｉｇ．４）。我们构建的是高效表达质粒，其上含有巨细胞病毒增强子和?

关 键 词：cGH gene gene transfer transgenic crucian carp 

分 类 号：S961.1[农业科学—水产养殖]