固相DNaseⅠ足迹法研究DNA-蛋白质相互作用  

A Method for the Study of DNA-Protein Interaction:Solid-Phase DNaseⅠ Footprinting

作　　者：徐冬冬[1] 刘德培[1] 吕湘[1] 徐海明 张伸 梁植权[1] 

机构地区：[1]中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

出　　处：《生物化学与生物物理进展》2001年第4期587-590,共4页Progress In Biochemistry and Biophysics

基　　金：国家自然科学基金 (3 9470 3 90 ) ;杰出青年科学基金 (3 95 2 5 0 0 6);自然科学基金重大项目 (3 9893 3 2 0 )资助~~

摘　　要：传统的DNaseⅠ足迹法程序繁杂 ,并且要求目的蛋白经过一定程度的纯化 .而固相DNaseⅠ足迹法通过结合有模板的磁珠 ,先富集序列特异的DNA结合蛋白 ,进行DNaseⅠ酶切 ,然后用测序胶分离并分析结果 .此方法简便易行 ,重复性好 ,并减少了对操作者的放射性损害 。DNaseⅠ footprinting is labor intensive, time consuming and the target protein should be purified to some extent.Solid phase DNaseⅠ footprinting can enrich a sequence specific protein by target DNA immobilized onto paramagnetic beads. After DNaseⅠ digestion, separate the products by sequencing PAGE. This new method is quick ,simple and repeatable,which can minimize the exposure of the researcher to radiation. The solid phase approach may also facilitate the analysis of factors using crude protein mixtures.

关 键 词：固相DNase足迹法 磁珠 化学裂解法 NDA-蛋白质相互作用 核蛋白 

分 类 号：Q522[生物学—生物化学] Q513.1