大鼠脑特异基因rRP58的克隆及定位分析  

Cloning and Distribution of rRP58, A Novel Neuronal Gene

作　　者：康建胜[1] 杨永臣 刘海兰[2] 李永红[2] 杜雨苍[1] 李荣秀[2] 

机构地区：[1]中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所,上海200031 [2]中国科学院上海生命科学研究院生物工程研究中心,上海200233

出　　处：《生物化学与生物物理学报》2001年第5期563-568,共6页

基　　金：中国科学院生物科学与生物技术研究特别支持费课题 (财政部专项 )的资助 (KJ95T 0 6 )&&

摘　　要：EST(AW 0 5 5 733)是在SD大鼠脑内一特异表达基因cDNA的 3′端片段 ,与人和小鼠的一个转录抑制因子基因 (RP5 8)同源。利用RT PCR的方法 ,从SD大鼠脑中得到rRP5 8基因两个不同长度的转录本。全长的rRP5 8基因编码产物为C2 H2 型锌指蛋白 ,含两个保守结构域 :氨基端的POZ结构域及羧基端的锌指结构域 (ZFD)。在POZ和ZFD结构域之间的序列 ,BLAST搜索未发现保守结构 ,但是富含酸性氨基酸残基。将编码ZFD结构域 (nt10 33～ 15 6 9)及POZ结构域 (nt 1～ 372 )的序列克隆到原核表达载体 pQE30中 ,表达并分离纯化了His6 ZFD和His6 POZ(融合了 6个组氨酸标签的蛋白质产物 )。用His6 ZFD和His6 POZ免疫兔子后 ,得到了ZFD和POZ两者的多克隆抗体 ,并利用所制备的抗体进一步分析了rRP5 8基因多转录本产物在大鼠中的组织分布 ,免疫组织化学实验结果显示rRP5EST (AW055733) is a 3′cDNA fragment specially expressed in rat brain. It is homologous to human and mouse RP58 gene, which is a transcriptional repressor gene. Primers were designed based on these two genes, and then two transcripts of rRP58 gene were got from male SD rat using RTPCR method. The rRP58 protein is a C 2H 2 type zinc finger protein, containing POZ domain at Nterminal and zinc finger domain (ZFD) at Cterminal. In addition, there is a highly acidic region between POZ and ZFD. POZ and ZFD were cloned, expressed and purified. Then, the antibodies to POZ and ZFD were prepared, and used to analyze distribution of alternative transcripts of rRP58.

关 键 词：rRP58 锌指结构 POZ 大鼠脑 基因定位 抗体 

分 类 号：Q785[生物学—分子生物学]