一个含WD结构域蛋白的基因在鱼类卵子发生过程中的差异表达及其特征分析  

作　　者：文建军[1,2] 谢京 刘世贵[1] 桂建芳[3] 

机构地区：[1]四川大学生命科学学院 [2]中国科学院水生生物研究所淡水生态和生物技术国家重点实验室,武汉430072 [3]中国科学院水生生物研究所淡水生态和生物技术国家重点实验室

出　　处：《中国科学（C辑）》2001年第4期343-352,共10页Science in China(Series C)

基　　金：国家自然科学基金(批准号:30070402);国家重点基础研究发展规划批准号:G1999053908);淡水生态与生物技术国

摘　　要：用抑制性差减杂交结合ＳＭＡＲＴ　ｃＤＮＡ合成和ＲＡＣＥ－ＰＣＲ技术的综合方法，从鱼类卵母细胞卵黄形成后期差减文库中克隆到一个新的含ＷＤ结构域蛋白的基因．该基因ＣＤＮＡ全长为１８７０ ｂｐ，可读框长９９０ ｂｐ，编码的蛋白质由３２９个氨基酸组成，含有６个ＷＤ结构域；５’非编码区长 ２１０ ｂｐ，３’非编码区长 ６７０ ｂｐ，有脊椎动物典型的ＡＮＮＡＴＧ起始序列和ｐｏｌｙＡ加尾信号ＡＡＴＡＡＡ．由于其编码的蛋白质与ＳＴＲＡＰ蛋白（ｓｅｒｉｎｅ－ｔｈｒｅｏｎｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ）有９２％的同源性，所以把它称为ＦＳＴＲＡＰ（ｆｉｓｈ ＳＴＲＡＰ）．虚拟Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交表明，ＦＳＴＲＡＰ在卵母细胞的卵黄形成后期表达，而在卵黄形成前期（Ｉ时相卵母细胞）不表达．各种组织的ＲＴ－ＰＣＲ显示，ＦＳＴＲＡＰ在脑、心、肾、肌肉、卵巢、脾和精巢有转录，而在肝脏中未见扩增带．不同发育时相卵母细胞的ＲＴ－ＰＣＲ表明，ＦＳＴＲＡＰ在第Ⅱ—Ⅴ时相都有转录．Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交也显示ＦＳＴＲＡＰ在除肝组织外的多种组织中都表达，与ＲＴ－ＰＣＲ结果相同，ＦＳＴＲＡＰ在卵黄形成前期几乎不表达，从第Ⅱ?

关 键 词：银鲫 卵母细胞 卵子发生 抑制性差减杂交 WD结构域 卵黄积累分子机制 基因克隆 基因表达 

分 类 号：Q344.11[生物学—遗传学]