环腺苷酸应答元件结合蛋白(CREB)参与人hsp90β基因的热诱导表达  

作　　者：刘秉胜[1] 吴宁华[1] 沈珝琲[1] 

机构地区：[1]中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室,北京100005

出　　处：《科学通报》2001年第15期1300-1303,共4页Chinese Science Bulletin

基　　金：国家自然科学基金资助项目(批准号:39930050;39770169).

摘　　要：为研究ｃＡＭＰ应答元件（ＣＲＥ）在人热休克蛋白ｈｓｐ９０β基因表达中的作用，构建了数个受ｈｓｐ９０β基因不同长度调控片段介导的氯霉素乙酰基转移酶（ＣＡＴ）报告基因质粒．分别转染Ｊｕｒｋａｔ细胞并检测４２℃１ｈ热诱导前后 ＣＡＴ活性．结果发现删除ｈｓｐ９０β基因上游含ＣＲＥ片段（－１７３／－９１ｂｐ）后，ＣＡＴ的热诱导表达活性降低了６７％．电泳迁移率变更分析（ＥＭＳＡ）显示热休克后Ｊｕｒｋａｔ细胞的核抽提物中磷酸化的ＣＲＥＢ与该片段呈特异性结合．Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹实验及ＰＫＡ活性检测发现ＣＲＥＢ的磷酸化程度及ＰＫＡ活性均随热诱导时间的延长而增加．以上结果表明：磷酸化的ＣＲＥＢ通过与ｈｓｐ９０β因上游的ＣＲＥ结合参与该基因的热诱导表达，并可能与ＰＫＡ传导途径有关．

关 键 词：HSP90Β基因 CREB 环腺苷酸应答元件 结合蛋白 热诱导表达 人热体克蛋白 

分 类 号：Q513[生物学—生物化学]